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取15日龄左右的鸭胚肝脏,经清洗、剪碎后,加入最终浓度为0.125%的胰酶,37℃消化15~20分钟,以含犊牛血清的199培养基为营养液,置含5%CO_2培养箱内培养72小时,可制成鸭胚肝细胞单层培养物,若向培养基中加入10%的鸭胚尿囊液,能促进细胞的生长,接种鸭肝炎病毒后,感染细胞可在48小时出现CPE,96小时形成空斑。