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使用两步发酵法培养博伊丁假丝酵母（Candida boidinii），菌株细胞经破碎与分离所得粗酶液经DEAE SepHaroses Fast Flow层析快速纯化获得NAD＋依赖型的甲酸脱氢酶，酶的比活从0.83U／mg提高到2.67U／mg，纯化倍数和回收率分别为3.22倍和29.7％。研究了从反应物消耗到产物生成之间的酶反应历程，确定了甲酸脱氢酶的酶促反应为有序BiBi反应机制，其中NAD^＋是第一底物，HCOONa是第二底物，NADH是首先释放的第一产物，HCO3^-是随后释放的第二产物；二次作图