目的 研究在暴发性肝衰竭小鼠中肠道紧密连接蛋白claudin-1表达的改变以及与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系.方法 采用脂多糖(LPS,10 μg/kg)联合D氨基半乳糖(D-GalN,800mg/kg)腹腔注射制作小鼠暴发性肝衰竭模型.同时分别腹腔注射脂多糖(10 μg/kg)、D氨基半乳糖(800 mg/kg)、生理盐水(2ml/kg)设立各对照组.肝衰竭小鼠给致衰竭药物前尾静脉注射抗TNF-αIgG抗体(100 μg/只)设立TNF-α IgG抗体组.分别在肝衰竭组小鼠给药2、6、9、12、24 h后,各对照组及TNF-α IgG抗体组给药9h后将小鼠处死,取材大肠组织.应用免疫组织化学技术、Western blot及实时定量PCR检测暴发性肝衰竭进程中,小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白claudin-1的定位、表达及mRNA的变化.结果 免疫组化发现claudin-1蛋白主要沿小鼠大肠黏膜上皮细胞膜的顶端和隐窝处呈线状分布.肝衰竭组小鼠给药9h后,claudin-1阳性染色明显减少.Western blot显示和生理盐水对照组相比,肝衰竭组小鼠给药6、9h后,claudin-1蛋白表达明显减少(6 h:0.86±0.0208 vs1.0,P＜0.05;9 h:0.6633±0.0328 vs 1.0,P＜0.01).实时定量PCR显示肝衰竭组小鼠给药6、9、12 h后claudin-1 mRNA表达明显减少(6 h:0.3067 ±0.1291 vs 1.0,P＜0.05;9 h:0.2233 ±0.1155 vs1.0,P＜0.01;12 h:0.5275 ±0.1222 vs 1.0,P＜0.05).TNF-α IgG抗体组给药9h后与生理盐水对照组相比claudin-1蛋白和基因表达无明显变化(蛋白:0.9533 ±0.0186 vs 1.0,P＞0.05;mRNA:0.85±0.1437 vs 1.0,P＞0.05).结论 在暴发性肝衰竭小鼠模型中,TNF-α可使claudin-1蛋白和mRNA表达减少,从而破坏紧密连接结构,促进自发性细菌性腹膜炎的形成。
暴发性肝衰竭时肠上皮细胞间紧密连接蛋白claudin-1表达下降
【摘 要】
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目的 研究在暴发性肝衰竭小鼠中肠道紧密连接蛋白claudin-1表达的改变以及与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系.方法 采用脂多糖(LPS,10 μg/kg)联合D氨基半乳糖(D-GalN,800mg/kg)腹腔注射制作小鼠暴发性肝衰竭模型.同时分别腹腔注射脂多糖(10 μg/kg)、D氨基半乳糖(800 mg/kg)、生理盐水(2ml/kg)设立各对照组.肝衰竭小鼠给致衰竭药物前尾静脉注射抗
【机 构】
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110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科，辽宁省丹东市宽甸县中心医院感染科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院传染科,110001沈阳
【出 处】
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中国医师杂志
【发表日期】
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2013年15期
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