【摘 要】
：
目的克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pCDNA3/VEGF165真核表达载体,观察其在人成肌细胞中的表达.方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人肝癌细胞株SMMC-
论文部分内容阅读
目的克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pCDNA3/VEGF165真核表达载体,观察其在人成肌细胞中的表达.方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人肝癌细胞株SMMC-7721中扩增出血管内皮生长因子VEGF165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pCDNA3真核表达载体上,构建成pCDNA3/VEGF165重组质粒,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定,应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入体外培养的人成肌细胞内,并用免疫组化法观察其表达.结果经酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验克隆的基因片段为人VEGF165cDNA,重组质粒pCDNA3/VEGF165转染人成肌细胞后,VEGF表达明显增高.结论本实验成功地克隆了VEGF165基因,为进一步研究用肌肉细胞内转染VEGF基因的方法来恢复或增强放疗后组织的血管生成能力奠定了基础.
其他文献
通过对CRH的受体和结合蛋白的研究,发现CRH在中枢和外周均有分布,作用广泛,是一种重要的神经递质.它在神经内分泌调节、自律性、行为学、炎症反应和神经精神疾病中扮演了重要
目的从代谢角度了解冠状动脉搭桥温血心肌保护的效果.方法52例冠状动脉搭桥患者于阻断升主动脉前后不同时间点抽取心肌灌注血及灌注后流出血,观察心肌代谢指标动态变化及心肌
瘦素作为一种多效性的激素,参与维持机体免疫系统的动态平衡,调节生殖以及血管的生成等.瘦素在呼吸系统方面的作用也日益受到重视.胎儿和成人肺组织是瘦素的反应和产生器官,
在医学实验中,乌拉坦作为常用的麻醉剂,与其他麻醉剂相比,具有价廉、易配制、麻醉效果稳定、维持时间长等优点,而且对实验家兔的呼吸无明显抑制.除了麻醉效应外,乌拉坦还具有
目的制备兔抗重组生殖支原体粘附素蛋白(rMgPa)的多克隆抗体(pAb),以期筛选MgPa的模拟表位。方法用rMgPa免疫新西兰兔以制备兔抗rMgPa的pAb,以此pAb为靶分子对噬菌体展示随机
目的了解泉州市4株血抑试验低反应性H3N2亚型流感病毒HA1基因变异特征。方法选取2009年分离的4株血抑低反应性H3N2流感病毒,进行HA片段核苷酸序列测定并用Mega软件制作种系进
利用琼脂扩散法从蓝麻黄内生菌中筛选出对农作物致病菌和动物病原菌具有较强抑制活性的内生真菌XJEG-GF-82,其对对玉米小斑病菌、西瓜枯萎病菌的抑菌圈直径分别达18 mm和16 m
支原体肺炎是儿童社区获得性呼吸道感染引起的常见的肺炎之一,占小儿肺炎的20%以上,目前研究显示其感染率呈现显著性上升趋势[1].支原体肺炎主要发生于学龄前或者学龄期儿童,
目的 本研究观察阿托伐他汀对博莱霉素诱导大鼠肺成纤维细胞的干预作用及其分泌的MMP-9、TIMP-1的影响,为探讨阿托伐他汀抗肺纤维化作用的机制提供实验依据.方法 博莱霉素制
中红侧沟茧蜂Microplitis mediator不同个体的畸形细胞在开始形成时,数目和大小比较恒定,为930±78个,直径13.6±1.8μm.到寄生后期,不同个体间的数目和大小变化很大,其变异