苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性

• 作 者: 李海涛 姚江 郭巍 宋福平 高继国 黄大昉 张杰
• 机 构: 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,东北农业大学生命科学学院,中国农业科学院生物技术研究所
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2005年6期
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 cry2Aa基因 克隆 表达 杀虫活性 Bacillus thudngiensis cry2Aa gene cloning express

B-8-G和Ly30是我国自行分离的对多种重要农业害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株,经PCR-RFLP鉴定均含有cry2Aa基因.根据cry2Aa全长基因序列设计特异引物,以B-8-G总DNA为模板扩增其中的cry2Aa全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-21b相连接,获得含有cry2Aa全长基因的重组质粒pET2Aa,该基因在大肠杆菌BL21菌株能够正常表达65 kD蛋白.通过构建Ly30总DNA文库方法从中筛选获得c