【摘 要】
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目的 建立SMMC-7721人肝癌细胞株与CCC-HEL-1人正常肝细胞株MicroRNA(miRNA)差异的表达谱,确定差异的miRNA,为进一步研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用和肝癌的治疗提供新的
【基金项目】
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本课题受河南省高校科技创新团队支持计划项目资助;
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目的 建立SMMC-7721人肝癌细胞株与CCC-HEL-1人正常肝细胞株MicroRNA(miRNA)差异的表达谱,确定差异的miRNA,为进一步研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用和肝癌的治疗提供新的线索.方法 体外培养SMMC-7721人肝癌细胞株和CCC-HEL-1人正常肝细胞株.用TRIzol法提取细胞的总RNA.用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳对RNA进行质量检测.用miRNA芯片技术检测细胞株中miRNA表达.用实时PCR对感兴趣的miRNA进行验证.结果 芯片筛选结果显示肝癌细胞株中上调2倍以上的miRNA有154个,4倍以上的miRNA有64个,10倍以上的miRNA有26个;下调2倍以上的84个,下调的4倍以上的22个,下调5倍以上的有10个,下调10倍以上的一个.实时PCR验证结果提示hsa-miR-205和hsa-let-7f在肝癌中上调2.7和2.3倍.结论 SMMC-7721和CCC-HEL-1细胞株之间存在差异性表达的miRNA分子.在建立的两株细胞miRNA差异表达谱中,发现hsa-miR-205和has-let-7f在肝癌中明显上调.
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