【摘 要】
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目的探讨人外周血扩增的γδT细胞体外扩增能力及其对消化道肿瘤细胞的杀伤作用。方法用含唑来膦酸和rh IL-2的RPMI 1640培养基培养正常人外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属肿瘤医院消化内科二病房;
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目的探讨人外周血扩增的γδT细胞体外扩增能力及其对消化道肿瘤细胞的杀伤作用。方法用含唑来膦酸和rh IL-2的RPMI 1640培养基培养正常人外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测活化前后γδT细胞的百分比,乳酸脱氢酶释放法测定经不同浓度唑来膦酸(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L)体外扩增后的γδT细胞与消化道肿瘤细胞株(HCT-116、HCCC-9810、LOVO、GBCSD)按不同效靶比(3∶1,10∶1,30∶1)孵育后进行杀伤活性测定。结果 (1)流式细胞术结果显示:不同浓度的唑来膦酸(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L)均可促进γδT细胞增殖,在5μmol/L浓度的唑来膦酸组对γδT细胞增殖促进作用最明显(P <0. 05)。(2)γδT流式测定结果显示:PBMC经唑来膦酸体外诱导后γδT细胞比例显著升高(96. 15%±1. 4849%,P=0. 0001 <0. 05)。(3)杀伤检测结果显示:γδT细胞对消化道肿瘤有杀伤活性,在效靶比为30∶1时对胆管癌细胞(HCCC-9810)及肠癌细胞(HCT116)的杀伤率分别为21. 90%±6. 6468%和30. 15%±8. 2731%。结论人末梢血PBMC经Zol+IL-2活化后可获得大量纯度较高的γδT细胞,在体外对消化道肿瘤有杀伤作用。γδT细胞将成为肿瘤细胞免疫治疗中又一重要的免疫效应细胞。
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