【摘 要】
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为建立一种猪德尔塔病毒(PDCoV)的快速检测方法,本研究根据NCBI公布的PDCoV序列设计了1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增PDCoV的S基因,将其连接至pMD19-T载体上,以构建正确的
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,广西壮族自治区动物疫病控制中心,军事科学院军事兽医研究所,温州大学病毒学研究所
【基金项目】
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广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053073),浙江省青年基金项目(LQ19C180001),温州市基础性科研项目(N20190005,N20180010)。
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为建立一种猪德尔塔病毒(PDCoV)的快速检测方法,本研究根据NCBI公布的PDCoV序列设计了1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增PDCoV的S基因,将其连接至pMD19-T载体上,以构建正确的重组质粒作为标准品,建立SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的敏感性、特异性及重复性进行了验证分析。结果显示:该检测方法在标准品浓度为6.26×101~6.26×108copies/μL范围内呈良好线性关系,其相关性为0.999,斜率为-4
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