T载体在噬菌体单链抗体库中的应用

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目的 将T载体用于提高PCR产物的克隆效率,以构建大库容量的噬菌体单链抗体库。方法 用传统的直接酶切的方法处理抗体轻链,直接连到经相同酶切的表达载体构建轻链抗体库;同时制备T载体,将抗体轻链克隆于T载体建成T载体克隆文库。然后再把轻链从T载体上切下来克隆到噬粒表达载体pDAN5,构建轻链抗体库。比较两种方法的效率。结果 制备的T载体质量较好,可以满足建库所需,轻链T载体库为28×10^8,经过T载体过渡比直接酶切连接效率要高出将近1000倍。结论 T载体的应用较好的解决了PCR产物克隆困难的问题
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