FimH1-156融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化

• 作 者: 尹仕伟 邹丽云 张莹 张晋宇 唐莎 施维维 吴玉章 袁发焕
• 机 构: 第三军医大学新桥医院肾内科,第三军医大学全军免疫研究所
• 出 处: 重庆医学
• 发表日期: 2014年5期
• 关键词: FIM H1 -156 融合蛋白 表达 纯化 FimH1 -156fusion proteinexpressionpurification
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30971366）；重庆市国际合作项目（CSTC201110004）；第三军医大学科研课题（2011XLC37）

目的：构建含有与溶酶体膜蛋白2（LAMP-2）P41-49完全同源序列的尿路致病性大肠杆菌（UPEC）Ⅰ型菌毛FimH1-156为目的基因的原核载体，表达并纯化FimH1-156融合蛋白。方法采用PCR克隆pPKL241质粒获取 FimH1-156基因，插入原核表达载体pET28a（＋）；将重组表达质粒转染感受态 E ．coli BL21（DE3），经IPTG诱导表达 FimH1-156融合蛋白，超声裂解细菌，Ni-NTA层析法进行纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析、蛋白免疫印迹法（West