【摘 要】
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比较大肠杆菌来源的左旋门冬酰胺酶(E.coli-L-Asp)与欧文菌来源的左旋门冬酰胺酶(Erwinia-L-Asp)体外抗白血病作用,并探讨其作用机制。以两种来源的L-Asp分别处理急性淋巴细
【基金项目】
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广州市科技局基金项目(2011Y1-00034)
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比较大肠杆菌来源的左旋门冬酰胺酶(E.coli-L-Asp)与欧文菌来源的左旋门冬酰胺酶(Erwinia-L-Asp)体外抗白血病作用,并探讨其作用机制。以两种来源的L-Asp分别处理急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株(REH、Jurkat),采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化(IC50),Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,高压液相色谱(HPLC)检测用药后培养液中4种氨基酸[门冬酰胺(Asn)、门冬氨酸(Aspa)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)]浓度的变化。结果表明,REH、Jurkat细胞株对两种L-Asp的抑制作用均敏感,且在一定时间内存在明显剂量效应关系,即在较低的药物浓度下,细胞增殖抑制率处于较低水平,而药物浓度增加后,细胞的增殖抑制率明显升高,其中作用后24 h,Erwinia-L-Asp组细胞抑制率、细胞凋亡率均明显高于E.coli-L-Asp组(P<0.05),但至48 h两组比较差异无显著性(P>0.05)。两种药物在低浓度时均能耗竭培养液中的Asn,且作用相当(P>0.05),高浓度时耗竭Gln作用才凸显,而Erwinia-L-Asp的作用明显强于E.coli-L-Asp(P<0.05)。结论:两种菌种来源的L-Asp抗白血病作用与剂量存在量效关系,除耗竭外环境中的Asn和Gln外,诱导细胞凋亡也是其抗白血病作用之一。ErwiniaL-Asp具有起效快、Gln耗竭作用较强的特点,可作为临床儿童ALL治疗的一线药物选择。
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