血红素氧合酶-1基因真核表达载体的构建及其在大鼠腹膜间皮细胞中的表达

• 作 者: 朱淳 郭志勇 刘怡晟 黄海东 蒋更如
• 机 构: 上海交通大学医学院附属新华医院肾内科,第二军医大学附属长海医院肾内科
• 出 处: 上海交通大学学报：医学版
• 发表日期: 2013年4期
• 关键词: 血红素氧合酶-1 表达载体 腹膜间皮细胞 大鼠 heme oxygenase-1 expression vector peritoneal mesothel
• 基金项目: 上海市卫生局基金（20114335）

目的构建大鼠血红素氧合酶-1（HO-1）真核表达载体，并以该重组表达载体体外转染培养的大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）。方法从SD大鼠脾脏中提取总RNA，并经RT—PCR扩增HO-1基因的CDS区全长片段，将PCR产物克隆至pMD-18T载体，BamHI和KpnI双酶切后获取HO-1片段，用T。DNA连接酶将HO-1片段与双酶切后的真核表达载体peDNA3．1（-）连接，构建大鼠HO-1真核表达载体pcDNA3．1（-）-HO-1。酶切鉴定和测序验证后，利用脂质体介导将重组质粒转染原代培养的RPMCs，通过