【摘 要】
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目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合过表达的微小RNA-203(microRNA-203,miR-203)对白血病K562细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法:将miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K56
【机 构】
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广西壮族自治区民族医院检验科,广州市番禺区中心医院检验科,广州医科大学附属第二医院神经科学研究所,
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目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合过表达的微小RNA-203(microRNA-203,miR-203)对白血病K562细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法:将miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞,Real-time PCR检测细胞内miR-203的表达。将K562细胞分为空白对照组、As2O3组、pmiR-203组、空质粒对照组、As2O3联合空质粒对照组和As2O3联合pmiR-203组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术仪检测细胞凋亡率,Western Blotting检测细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。构建Bcr/abl 3’UTR和Bcr/abl mut-3’UTR的双荧光素酶报告基因载体,将其与pmiR-203共转染K562细胞,通过荧光素酶活性分析判断miR-203是否与Bcr/abl基因的3’UTR结合。结果:miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞后,细胞内miR-203的表达水平明显增高(P<0.05)。高表达miR-203联合As2O3使K562细胞对As2O3的敏感性提高到单用As2O3的4.86倍,IC50从3.4μmol/L降低至0.7μmol/L,两者联用表现为协同作用。As2O3联合pmiR-203组的细胞凋亡率显著高于As2O3联合空质粒对照组[(29.97±3.19)%vs(10.77±1.71)%,P<0.05]。过表达miR-203显著下调K562细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。Bcr/abl 3’UTR中带有明确的miR-203结合位点。结论:miR-203可提高白血病K562细胞对As2O3的敏感性,miR-203和As2O3联用对K562细胞具有协同抑制作用,其作用机制可能与miR-203直接下调Bcr/abl融合基因的表达有关。
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