大鼠PAX2真核表达质粒构建及瞬时转染肾小管上皮细胞模型建立

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目的为进一步研究核转录因子(PAX2)对。肾小管上皮细胞的转分化调控机制提供依据。方法真核表达质粒(PGC—FU)-PAX2真核表达质粒的构建:设计PAX2的引物,PCR法从单侧输尿管结扎大鼠肾脏中扩增出目的片段,酶切后定向连入PGC.FU载体,将该重组质粒转化到Ecoli感受态细胞中,通过氨苄青霉素抗药性筛选出成功转化的阳性克隆,并进行扩增;通过PCR及基因测序检测其构建的正确性;PGC—FU—PAX2瞬时转染肾小管上皮细胞模型的建立:脂质体转染法将重组质粒转入肾小管上皮细胞(NRK52E细胞),RT-
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