【摘 要】
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目的构建含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的杆状病毒表达载体,并对其表达产物的生物学活性进行测定。方法用HindⅢ对peDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575bp的VEGF片段;pFasta载体用Hi
【机 构】
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首都医科大学生物化学与分子生物学系,首都医科大学医学实验与测试中心
【基金项目】
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北京市科委科技合同奖金(954024800)资助项目
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目的构建含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的杆状病毒表达载体,并对其表达产物的生物学活性进行测定。方法用HindⅢ对peDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575bp的VEGF片段;pFasta载体用HindⅢ酶切回收,与VEGF片段连接。NcoI酶切鉴定方向,得到正向连接重组载体pFast/VEGF将其转化DH10BAC感受态细胞,经卡那霉素、四环霉素、庆大霉素及蓝白斑筛选得到重组杆状病毒载体pBacmid-Fa-VEGF,PCR扩增鉴定得到单一VEGF条带。将该病毒载体转染sf9细胞,用噬斑筛选
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