逆转录病毒介导的稳定表达E4orf1和绿色荧光蛋白的胎肝窦内皮细胞株的建立

• 作 者: 李慧琳 谢小燕 王思涵 韩毅 范增 白云 何丽娟 南雪 裴海
• 机 构: 南方医科大学检验与生物技术学院,军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所军事再生医学研究室,军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所实验血液学与生物化学研究室,华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2018年4期
• 关键词: 肝窦内皮细胞 逆转录病毒 腺病毒E4区开放读框1(E4orf1) 造血干细胞 fetal liver sinusoid endothelial cell re
• 基金项目: 国家重点研发计划（2017YFA0103100,2017YFA0103103,2017YFA0103104）,国家自然科学基金（81472908）

目的：为构建优化的内皮细胞用于造血干细胞（HSCs）的支持培养,通过逆转录病毒载体系统建立稳定表达腺病毒E4区开放读框1（E4orf1）和绿色荧光蛋白（GFP）的人胎肝窦内皮细胞（HFLSECs）株。方法：利用Plat-A细胞将质粒MSCV-N E4orf1和p MX-GFP分别包装为逆转录病毒,共同感染HFLSECs,将原代培养的HFLSECs和转基因的HFLSECs分别在含有0.5、1、2、4μg/m L嘌呤霉素的EGM-2培养基中培养,以测试最适药物筛选浓度,药筛1周后通过流式细胞分选获得稳定转染E