【摘 要】
：
目的:筛选高表达单克隆细胞株,并通过优化培养基及流加物,最终达到提高目的蛋白产量及质量的目的。方法:通过有限稀释法对转染目的蛋白的CHO-S细胞进行单克隆化,应用双抗夹心
【机 构】
：
中国药科大学; 上海天士力药业有限公司;
论文部分内容阅读
目的:筛选高表达单克隆细胞株,并通过优化培养基及流加物,最终达到提高目的蛋白产量及质量的目的。方法:通过有限稀释法对转染目的蛋白的CHO-S细胞进行单克隆化,应用双抗夹心ELISA方法对单克隆细胞株抗体表达量进行初步评估,最后根据筛选细胞株的活率、密度、产量及代谢情况,选择2~3株单克隆细胞进行培养条件优化,并对获得的发酵液进行纯化捕获,根据抗体蛋白表达量、糖型、等电点、纯度、酸碱峰分布等进行相应的评估分析,筛选出最优细胞株及最优培养方案。结果:经过单克隆化处理以及培养条件优化,蛋白的表达量由初始的不到500mg/L提升到2 290mg/L,且抗体蛋白纯度高达97.48%。抗体蛋白质量分析结果显示B1方案为该实验最优培养方案。结论:通过细胞株筛选、培养基优化能显著提高抗体蛋白的产量及质量,同时对抗体蛋白糖型、等电点、纯度等均有一定程度的优化。因此工业生产中可以通过高表达克隆的筛选、培养工艺优化等对目的蛋白产量及质量进行一定程度的改善与提高,对后期实验研究及工业化方案开发都具有很好的指导意义。
其他文献
近年来,各向同性的均匀微/纳米粒子已得到了广泛应用,各向异性的Janus粒子以其独特的性质而备受关注。Janus粒子为具有至少两个不同物理或化学性质表面的一类粒子,文章对Janu
在初中美术教学中应用信息技术有利于发挥学生的主体作用。结合实践经验,针对如何应用信息技术实现初中美术自主合作探究式教学提出几点思路。
<正>一天,大仲马得知他的儿子小仲马寄出的稿子总是碰壁,便对小仲马说:"如果你能在寄稿时,随稿给编辑先生们附上一封短信,或者是一句话,说‘我是大仲马的儿子’,或许情况就会
<正>随着规模化、集约化生猪养殖的发展,有些规模场在仔猪21日龄时断奶。但由于仔猪生理发育不成熟,抵抗能力较差,早期断奶极易引起腹泻,尤其是人为(环境、饲养管理等)引起的
学校体育环境是体育理论研究中一个非常重要而又容易被忽视的特殊领域.人们对学校体育环境作了许多局部的研究,但尚缺乏系统性,不能形成对学校体育环境的整体认识.通过文献资
奥美集团全球首席数码长Brandon Berger谈如何让数字化成为营销的核心平台,以及自己担任首席数码长的心得。新一轮的营销变革始于何时?答案可能众说纷纭。一个简单的划断是从
农产品物流是整个物流体系的分支,发展农产品低碳物流是我国低碳经济的客观需要。文章阐述了发展农产品低碳物流的重要性,农产品低碳物流的模式,发展农产品低碳物流的宏观与
党的十八大提出了实现更高质量就业、构建和谐劳动关系、社会保障全覆盖、深化人事人才制度改革等新目标、新任务,在全面建成小康社会和实现“中国梦”的伟大进程中,人力资源
测井约束地震反演是研究隐蔽油气藏的重要技术之一。以街202块为例，在地质储层特征研究的基础上，开展了以数据分析与处理为基础、子波提取与精细标定为保障、波阻抗模型为核心
随着经济社会的迅猛发展以及当今社会科技水平的不断提高,新闻传播业的发展不断壮大,传播的方式也经历着巨大的变革,从传统的报刊杂志到现在的互联网,人们见证了新闻传播业的