【摘 要】
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目的探讨番茄红素(Lyc)对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响,旨在为临床治疗糖尿病肾病提供可靠的理论依据。方法采用条件永生化小鼠足细胞系为研究对象,通过添加不同剂量的L
【机 构】
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武汉市中心医院肾内科,武汉科技大学附属天佑医院泌尿外科
【基金项目】
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武汉市卫生和计划生育委员会科研项目(No.WX16C43)
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目的探讨番茄红素(Lyc)对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响,旨在为临床治疗糖尿病肾病提供可靠的理论依据。方法采用条件永生化小鼠足细胞系为研究对象,通过添加不同剂量的Lyc对高糖诱导的足细胞进行干预。实验细胞分6组,分别为正常对照组(5.5m m ol/L葡萄糖)、高渗对照组(5.5 m m ol/L葡萄糖+1 9.5 m m ol/L甘露醇)、高糖组(2 5 m m ol/L葡萄糖)、低剂量Lyc组(25 mmol/L葡萄糖+3.125μmol/L Lyc)、中剂量Lyc组(25 mmol/L葡萄糖+6.25μmol/L Lyc)和高剂量Lyc组(25 mmol/L葡萄糖+12.5μmol/L Lyc)。在细胞培养4 8 h后,用吖啶橙染色法观察各组细胞的自噬体变化情况;流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率变化;采用实时定量荧光PCR和蛋白质印迹法分别检测自噬相关基因LC3、beclin-1、p62/SQSTM I m RNA和蛋白的表达变化情况。结果与正常对照组、高渗对照组相比,高糖组细胞中的自噬体数目明显增多,细胞的凋亡率极显著增加(P<0.01),自噬相关基因LC3-II、beclin-1的表达量显著增加(P<0.05),而p62/SQSTMI基因的表达量则显著降低(P<0.05)。与高糖组比较,不同剂量Lyc组中的足细胞自噬体数目更多;细胞的凋亡率显著降低(P<0.05),且高剂量Lyc组细胞的凋亡率降低极显著(P<0.01);自噬相关基因LC3-II、beclin-1表达量显著增加(P<0.05);而p62/SQSTMI基因表达量则显著降低(P<0.05);且高剂量Lyc组基因表达量变化极显著(P<0.01);蛋白水平上的检测结果与mRNA水平基本一致。结论Lyc能进一步增强高糖诱导引起的足细胞的自噬,但对足细胞的凋亡却起到了一定的抑制作用,且高剂量的Lyc作用效果更加明显。
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