【摘 要】
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目的以原核表达的狂犬病病毒M蛋白作为检测抗原，建立间接ELISA方法用来检测狂犬病病毒抗体。方法为表达狂犬病病毒（RV）基质蛋白（M），采用RT-PCR方法从狂犬病病毒Flury-LEP株中扩增RV
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站
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目的以原核表达的狂犬病病毒M蛋白作为检测抗原，建立间接ELISA方法用来检测狂犬病病毒抗体。方法为表达狂犬病病毒（RV）基质蛋白（M），采用RT-PCR方法从狂犬病病毒Flury-LEP株中扩增RV基质蛋白基因，双酶切后定向克隆至原核表达载体pET一32a（＋），构建重组质粒pET～M。将重组质粒pET-M转化至宿主菌E．coliRosetta中进行表达。SDS-PAGE和Westernblot分析确定蛋白表达量和特异性。用纯化的重组M蛋白作为包被抗原建立检测犬RV抗体的间接ELISA方法，通过优化反应条
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