人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

• 作 者: 别俊 孙茂盛 孙强明 郑建平 孙雯佳
• 机 构: 昆明医学院研究生部,中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所分子生物室,昆明市延安医院
• 出 处: 第一军医大学学报
• 发表日期: 2004年8期
• 关键词: surivivin 克隆 基因表达 纯化 survivin cloning gene expression purification

目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子.方法应用RT-PCR的方法得到survivin的cDNA,并构建成pBV220-survivin原核表达质粒,将其导入E.coli B121(Gold)中,诱导表达survivin蛋白.通过DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白.用Western blotting检测表达产物.结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致,表达质粒在E.coli B121(Go1d