【摘 要】
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目的:探讨高良姜素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路及放射敏感性的影响.方法:体外培养NSCLC A549细胞,细胞计数试
【机 构】
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邯郸市中心医院肿瘤内一科,邯郸市中心医院放疗医技科
【基金项目】
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河北省医学科学研究课题计划项目(编号:20200488)。
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目的:探讨高良姜素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路及放射敏感性的影响.方法:体外培养NSCLC A549细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度(10,20,40,60,80,100μmol·L-1)高良姜素处理的A549细胞的增殖抑制率;将A549细胞经不同剂量(0,1,2,4,6,8 Gy)放射处理,并设置各剂量与35μmol·L-1高良姜素联用组,克隆形成实验观察高良姜素的放射增敏作用;将A549细胞分为高良姜素+放射线组(35μmol·L-1+6 Gy)、高良姜素组(35μmol·L-1)、放射线组(6 Gy)及对照组,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测增殖蛋白细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞增殖核抗原(Ki67)、凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9及STRT1/mTOR通路蛋白SIRT1、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、mTOR的表达.结果:与对照组比较,随着高良姜素浓度的增加,A549细胞增殖抑制率逐渐增加(P<0.05);与各剂量射线单独处理的A549细胞相比,35μmol·L-1高良姜素+各剂量射线处理的A549细胞存活分数降低(P<0.05),辐射增敏比(SER)=1.522;与对照组比较,高良姜素组、放射线组、高良姜素+放射线组A549细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著升高,CyclinD1、Ki67、SIRT1、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低(P<0.05);与高良姜素组、放射线组比较,高良姜素+放射线组A549细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著升高,高良姜素+放射线组CyclinD1、Ki67、SIRT1、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低(P<0.05).结论:高良姜素可能通过调控SIRT1/mTOR通路影响A549细胞的增殖凋亡及放射敏感性,可能是治疗NSCLC的潜在药物.
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