血管紧张素Ⅱ通过上调富含半胱氨酸蛋白61表达诱导HEK293T细胞凋亡

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liu0686
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目的探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用。方法HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)AngⅡ+Cyr61敲低组,以10-7mol/L AngⅡ处理细胞,48 h收集细胞用流式细胞仪检测细胞凋亡,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术及蛋白质免疫印迹技术检测细胞Cyr61及Bcl-2的mRNA及蛋白表达量。结果 Cyr61敲低组Cyr61蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),AngⅡ干预48 h后Cyr61蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低Cyr61后Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),与对照组凋亡率(11.88±1.46)%相比,Cyr61敲低组凋亡率为(3.87±0. 83)%,AngⅡ干预组HEK293T细胞凋亡率为(26.94±3.73)%(P<0.05),与AngⅡ干预组相比,Cyr61敲低+AngⅡ组凋亡率为(15.76±1.31)%(P<0.05)。结论 Cyr61表达量的上调与AngⅡ诱导的HEK293T细胞损伤有关,下调Cyr61的表达可以有效地保护AngⅡ诱导的细胞损伤。
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