人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达

• 作 者: 刘莉 胡红琳 丁振兴 王佑民
• 机 构: 安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科
• 出 处: 安徽医科大学学报
• 发表日期: 2006年6期
• 关键词: 胰高血糖素/遗传学 基因表达 glucagon/genetics gene expression

目的构建人胰高血糖素样肽-1突变体（^2Gly-hGLP-1）基因，并表达GST一^2Gly-hGLP-1。方法用限制性内切酶双酶切载有hGLP cDNA的重组克隆质粒PMD18T simple和原核表达质粒pGEX-4T-1，将GLP-1定向插入原核表达载体pGEX-4T-1^＊中，筛选出阳性克隆。在获得重组hGLP-1基因工程菌的基础上，利用定向突变的技术改造其第2位丙氨酸为甘氨酸，经酶切克隆于pGEX-4T-1^＊中，构建pGEX-4T-1^＊／^2Gly-hGLP-1表达载体。转化大肠杆菌BL21