【摘 要】
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目的 制备重组新孢子虫NcGRA2t全蛋白去掉信号肽多克隆抗体并纯化,研究其在新孢子虫虫体内的定位.方法 用新孢子虫NcGRA2t蛋白进行体外原核表达,纯化后免疫健康BALB/c小鼠,制
【机 构】
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延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002
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目的 制备重组新孢子虫NcGRA2t全蛋白去掉信号肽多克隆抗体并纯化,研究其在新孢子虫虫体内的定位.方法 用新孢子虫NcGRA2t蛋白进行体外原核表达,纯化后免疫健康BALB/c小鼠,制备抗血清,采用Western blot分析抗体特异性,采用免疫荧光法检测NcGRA2蛋白在新孢子虫处于细胞内阶段和细胞外阶段时的亚细胞定位. 结果 Western blot检测,制备的鼠抗NcGRA2t多克隆抗体能与新孢子虫裂解抗原发生特异性反应.间接免疫荧光分析,NcGRA2蛋白在细胞内阶段和细胞外阶段的虫体细胞质中均呈现绿色荧光. 结论 本研究制备并纯化了新孢子虫NcGRA2蛋白多克隆抗体,用该抗体可检测到新孢子虫NcGRA2蛋白存在虫体的细胞质中.
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