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利用新型荧光探针—分子信标，建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒（SIV）的HA和NA基因的保守基因序列，分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针，利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒pSK-H3和pSK-N2并绘制标准曲线。结果显示，该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL；与其它主要相关病毒均不发生交叉反应，批内和批间试验的重复性变异系数（CV）均小于3％，表明该方法灵敏度强、特异性好。此方法的建立将为流感病毒H3N2亚型定型检测提供一种快速有效的方法。