【摘 要】
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目的 探讨雌激素受体α(ERRα)通过调控肌钙蛋白Ⅰ表达促进心肌细胞成熟过程中的调控机制.方法 以胎龄14.5天(E14.5组)、17.5天(E17.5组)、新生(NB组)及出生后2周(P2W组)、出生后4周(P4W组)SPF级c57小鼠为研究对象.利用Q-PCR及Western blot检测ERRα、胚胎型肌钙蛋白Ⅰ(ssTnI)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、肌球蛋白重链α(αMHC)及肌球蛋白重链β(βMHC)在mRNA及蛋白水平的时空表达规律.利用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测ssTnI、cT
【机 构】
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成都市第一人民医院,四川成都610016;西南医科大学附属第一医院,四川泸州646000
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目的 探讨雌激素受体α(ERRα)通过调控肌钙蛋白Ⅰ表达促进心肌细胞成熟过程中的调控机制.方法 以胎龄14.5天(E14.5组)、17.5天(E17.5组)、新生(NB组)及出生后2周(P2W组)、出生后4周(P4W组)SPF级c57小鼠为研究对象.利用Q-PCR及Western blot检测ERRα、胚胎型肌钙蛋白Ⅰ(ssTnI)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、肌球蛋白重链α(αMHC)及肌球蛋白重链β(βMHC)在mRNA及蛋白水平的时空表达规律.利用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测ssTnI、cTnI、αMHC及βMHC启动子区域乙酰化水平以及ERRα与ssTnI、cTnI、αMHC及βMHC启动子结合水平.结果 ERRα、cTnI及αMHC在心脏发育过程中表达水平逐渐升高,其中ERRα和cTnI在生后2周达峰值(P＜0.05),后维持在稳定水平;αMHC则在P4W组表达水平最高,与其他各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);E14.5组心脏中ssTnI和βMHC表达水平较其余各组明显升高(P＜0.05);cTnI启动子乙酰化水平逐渐升高,在P2W组达高峰,同时ERRα与之启动子结合水平与cTnI表达水平一致,而ssTnI启动子乙酰化水平在各组间差异无统计学意义(P＞0.05),但E14.5组心脏中ERRα与ssTnI启动子结合水平显著高于其余各组(P＜0.05),αMHC和βMHC启动子乙酰化水平在各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),且ERRα与二者启动子结合水平亦在各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ERRα作为转录因子直接调控心肌肌钙蛋白亚型转化,进而促进心肌细胞成熟.
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