【摘 要】
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目的:体外研究载重组人血管内皮生长因子(recombinant human vascular endothelial growth factor,rhVEGF165)的邻苯二酚壳聚糖(catechol-chitosan,Cat-CS)支架材料对乳牙牙
【机 构】
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吉林大学口腔医院儿童口腔科,吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室
【基金项目】
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吉林省自然科学基金(编号:2014G075)
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目的:体外研究载重组人血管内皮生长因子(recombinant human vascular endothelial growth factor,rhVEGF165)的邻苯二酚壳聚糖(catechol-chitosan,Cat-CS)支架材料对乳牙牙髓干细胞(stem cells from pulpof deciduous teeth,SHED)血管形成的影响,为其在年轻恒牙牙髓再生中的应用提供理论基础。方法:结合酶联合消化法和倒置贴壁法分离培养SHED。经细胞形态、碱性磷酸酶和茜素红染色对SHED进行鉴定,通过噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测和对比壳聚糖(chitosan,CS)及Cat-CS的生物相容性,HE染色及扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)检测细胞在CS及Cat-CS上的粘附,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,real-time PCR)检测血管内皮细胞表面标记物CD31、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的表达。结果:SHED具有较强的增殖能力,碱性磷酸酶及茜素红染色阳性;MTT结果显示CS及Cat-CS对细胞无明显毒性;HE染色及SEM观察结果显示相比于CS,Cat-CS更有利于细胞在孔径内的延伸以及在其表面的粘附;与空白对照组比较,CS及Cat-CS能促进SHED表达CD31、VEGFR2和VE-cadherin,Cat-CS与rhVEGF165复合后,这些基因的表达进一步增加(P<0.05)。结论:Cat-CS具有良好的生物相容性,可以作为牙髓再生良好的支架材料。
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