【摘 要】
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目的 研究N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制甲氨蝶呤(MTX)皮肤毒性的作用和机制.方法 用MTX损伤HaCat细胞建立皮肤毒性模型.将实验细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组.
【机 构】
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南方医科大学 皮肤病医院 药剂科,广东广州,510091;中山大学 肿瘤防治中心 药学部,广东 广州,510060
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目的 研究N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制甲氨蝶呤(MTX)皮肤毒性的作用和机制.方法 用MTX损伤HaCat细胞建立皮肤毒性模型.将实验细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组.模型组加入50μg·mL-1 MTX处理24 h;低、中、高剂量实验组在模型组的基础上,分别加入50,100和200μmol·L-1 NAC培养24 h;空白组仅更换培养基,不作任何药物处理.通过CCK-8试剂盒检测HaCat细胞的存活率,用蛋白质免疫印迹法检测细胞周期以及凋亡通路相关蛋白的含量.结果 模型组和低、高剂量实验组的细胞存活率分别为(51.37±1.75)％,(69.17±2.35)％和(84.22±2.87)％,磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)分别为(0.32±0.02),(0.58±0.03)和(0.91±0.07),磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)分别为(2.15±0.16),(1.77±0.14)和(1.22±0.12),G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)分别为(0.42±0.03),(0.63±0.04)和(1.26±0.17),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)分别为(0.35±0.03),(0.62±0.05)和(0.94±0.07),Bcl-2相关X蛋白(Bax)分别为(2.45±0.18),(2.10±0.15)和(1.42±0.10),活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cl Caspase-9)分别为(2.56±0.19),(2.13±0.16)和(1.36±0.10),模型组的上述指标与低、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NAC能够通过调控AKT/GSK3β/Cyclin D1通路促进损伤的皮肤角质细胞增殖,并抑制线粒体损伤介导的Bcl-2/Bax/Caspase-9通路的凋亡效应,从而降低MTX的皮肤毒性.
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