【摘 要】
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目的 建立检测锥虫感染的PCR方法.方法 针对布氏锥虫表达位点相关基因(ESAG)设计引物并建立PCR扩增体系,检测其扩增效果.用梯度稀释的布氏锥虫DNA(10 μg/μl、1 ng/μl、100
【机 构】
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广州血液中心,广东广州,510095
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目的 建立检测锥虫感染的PCR方法.方法 针对布氏锥虫表达位点相关基因(ESAG)设计引物并建立PCR扩增体系,检测其扩增效果.用梯度稀释的布氏锥虫DNA(10 μg/μl、1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl和0.1 pg/μl)为模板评价其敏感性;用建立的PCR方法分别检测布氏锥虫、伊氏锥虫及克氏锥虫,评价方法的特异性,并比较PCR与镜检法的准确性.结果 PCR法扩增布氏锥虫的最低检测限为100 pg/μl;准确性为96.67％,高于镜检法的80.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).建立的PCR方法检测10株布氏锥虫均为阳性,10株克氏锥虫均为阴性,1株伊氏锥虫为阳性.结论 PCR法检测锥虫感染具有较高的敏感性和特异性,在布氏锥虫感染的早期诊断中具有较高应用价值.
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