冻存乳猪肝细胞的胶原凝胶培养研究

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目的探索乳猪肝细胞的冻存以及培养条件和方法.方法采用两步法分离乳猪肝细胞,液氮冻存4个月后复苏,与鼠尾胶原液混合后接种培养,或将肝细胞接种于胶原被覆的培养瓶中,然后被覆上第2层胶原培养,观察培养细胞的形态、白蛋白mRNA的表达、尿素合成及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的漏出量等.结果冻存肝细胞的活性维持较好,并成功地被固定于混合凝胶或三明治形凝胶中,较好地保持了尿素合成以及白蛋白mRNA表达能力.结论此冻存条件适合于猪肝细胞的长期保存,胶原凝胶可为肝细胞提供更接近体内的培养环境,较好地维持了肝细胞的功能和形
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