人CD59基因突变细胞模型的建立

• 作 者: 张艳丽 高美华 王秋波
• 机 构: 青岛大学医学院免疫学教研室
• 出 处: 青岛大学医学院学报
• 发表日期: 2007年1期
• 关键词: 基因 CD59 突变 中国仓鼠卵巢细胞 补体限制作用 genes CD59 mutation CHO complement restriction ac
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30170893）

目的建立表达人突变CD59的细胞模型，初步研究其活性。方法以正常的CD59基因全长cDNA序列为模板，应用重叠延伸PCR法产生突变使CD59糖基化基序K41-H44突变为K41-K42，产生突变CD59基因，将其克隆于pALTER质粒中，构建出重组真核表达载体。应用脂质体介导法，与pcDNA3质粒共转染中国仓鼠卵巢（CHO）细胞，以G418筛选阳性克隆。应用免疫化学染色及Western blot方法进一步检测突变CD59分子在转染细胞膜表面的表达。通过荧光染料释放试验，对突变CD59蛋白糖基化前后的补体限