重组人p75NTR169-Fc抗酶裂嵌合体在大肠杆菌中的表达、纯化及活性鉴定

• 作 者: 景丽玲 王欣 陈虹 张俊文
• 机 构: 中国医学科学院基础医学研究所／北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室
• 出 处: 医学研究杂志
• 发表日期: 2012年4期
• 关键词: p75NTR169-Fc P75NTR β-淀粉样肽(Aβ) p75 NTR 169 - Fc p75 NTR β - amyloid （ Aβ ）

目的制备重组人p75NTR169-Fc融合蛋白，其是-种潜在的抗凋亡和止痛的候选药物。方法（1）应刚PCR法，以本组保存的pUC12-NGFR和人肝cDNA为模板，扩增出p75NTR（1～169氨基酸），IgGFe（216～433氨基酸）基因顺序，冉按照重叠PCR的原则和方法，将两组扩增产物混合变性、复性后冉扩增，得到“p75NTR（1～169）-IgGFc（216～433）”融合基凶，缩写为p75NTR169-Fc。（2）应用DNA重组技术将p75NTR169-Fc融合DNA片段经NcoI、EcoRI酶