应用AdEasy-1腺病毒系统构建含人nm23-H1基因的重组腺病毒质粒

来源 :川北医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xpzcz1993

【摘要】

：

目的应用AdEasy-1腺病毒载体系统制备含人nm23-H1基因的重组腺病毒载体。方法设计带有限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切位点的引物，利用PCR法从质粒pMD18-T—nm23-H1上克隆出nm

【作者】

：

邱亚杨湛米方林柳华

【机构】

：

川北医学院附属医院口腔科,云南省第三人民医院,川北医学院第二临床学院

【出处】

：

川北医学院学报

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

：

nm23-H1基因腺病毒载体同源重组

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目的应用AdEasy-1腺病毒载体系统制备含人nm23-H1基因的重组腺病毒载体。方法设计带有限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切位点的引物，利用PCR法从质粒pMD18-T—nm23-H1上克隆出nm23-H1cDNA并定向连接至穿梭载体pShuttle—CMV上，行KpnⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定和测序。将pAdEasy-1腺病毒骨架载体电转化BJ5183感受态细菌，PmeⅠ酶线性化并去磷酸化处理重组质粒pShuttle—CMV—nm23-H1，并电转化含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌，利用卡

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