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摘要[目的]筛选适宜天麻区域性规模化种植所需的优良蜜环菌菌株。[方法]对不同来源的3份蜜环菌菌株（gza46、sb1、wmt1）与伴有萌发菌的天麻种子进行有性繁殖伴栽试验，测定天麻产量，并比较分析其差异。[结果]天麻有性繁殖栽种6个月，蜜环菌“gza46”菌株在其产量上较“sb1”菌株具有显著差异，与“wmt1”菌株差异不显著；有性繁殖栽培18个月，蜜环菌“gza46”菌株在产量（箭麻和种麻）上与“sb1”菌株均呈显著差异，与“wmt1”菌株差异不显著，但其中的单产种麻呈显著差异，单产箭麻相当。[结论]“gza46”号蜜环菌菌株适于贵州德江县及周边地区的天麻种植。
关键词 蜜环菌菌株；筛选；评价
中图分类号 S567.3+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）03-0131-02
Abstract[Objective] To screen out excellent Armillaria mellea strain suitable for largescale cultivation of Gastrodia elata. [Method] Three Armillaria mellea strains（gza46， sb1， wmt1） from different sources and Gastrodia elata seeds with germination bacteria were used to conduct sexual reproduction test， the yield of G. elata was determined， the differences were compared and analyzed. [Result] The test result showed that it is better Armillaria mellea gza46 than sb1 to increase the G. elata’s yield after six months， but the difference is not significant between gza46 and wmt1. After 18 months， there is a same test result. [Conclusion] gza46 should be a fine strain of Armillaria mellea for G. elata in Dejiang County and surrounding area in Guizhou.
Key words Armillaria mellea； Screening； Evaluation
天麻（Gastrodia elata）為蘭科植物，由于本身是无根、无同化功能的叶片，不能直接吸收环境中的营养[1]，除开花结实期外，天麻幼苗的形成、营养器官的更新以及营养生长转向生殖生长等过程都必须由蜜环菌（Armillaria mellea）来供应，没有蜜环菌天麻就不能生长[2]。但蜜环菌是蜜环菌属真菌的总称，全球报道有50余种，我国已报道了7种，该属真菌具有物种多样性特征[3]。蜜环菌来源不同其生物学特性具有差异，对天麻产量的影响也较大[4-5]，且生长发育还受环境及培养菌材的限制[6]。贵州省德江县是天麻之乡，野生天麻分布广，人工天麻种植面积较大，质量好，产量高，是全国重要的天麻生产基地。因此，研究筛选出适宜德江县及周边地区天麻规模化种植所需的优良蜜环菌菌株，对提高该区域天麻生产效率、促进地方经济发展具有重要意义。笔者对德江县高山镇野生蜜环菌菌材上分离到的“gza46”号菌株及当前生产用的“sb1”“wmt1”号菌株进行了天麻有性繁殖伴栽试验，研究其对天麻产量的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
该试验所用的3份蜜环菌菌株“gza46”由贵州省现代中药材研究所提供（德江县高山镇野生蜜环菌菌材上分离），“sb1”由贵州省施秉县民生天麻科技有限公司提供，“wmt1”由贵州乌蒙腾菌业有限公司提供；有性繁殖的天麻种子均由德江县绿通天麻发展有限公司提供（德江县本地品种），种子育种箭麻经贵州省农业科学研究院朱国胜研究员鉴定为红杆天麻。试验环境、菌材、菌种量和用种量均统一，操作规程全部执行贵州省德江县天麻省级地方标准。
1.2 试验方法
试验安排在德江县绿通天麻发展有限公司天麻基地进行，统一实行林下固定菌床二层栽培模式，所用菌材25 kg/m2，以青杠和桦树为主，种子蒴果15颗，萌发菌和蜜环菌各1包，重量分别为1.0和1.8 kg，试验中每个供试菌株重复5窝，且按照天麻地方标准进行管理。分别于6个月和18个月后统计产量，对所得数据进行方差分析（ANOVA）[7]，从而得出变量间的差异显著性。
2 结果与分析
2.1 有性繁殖6个月试验结果 该试验在实施过程中分别对3份菌株重复5次，有性繁殖6个月统一采收种麻，计算蜜环菌“gza46”“wmt1”“sb1”菌株伴栽天麻的平均产量分别是3 450.2、3 289.5、1 235.2 g/m2。方差分析结果显示，蜜环菌“gza46”菌株伴栽天麻有性繁殖6个月采收所得的产量（种麻）最高，与菌株“sb1”呈显著差异，与菌株“wmt1”相当；菌株“sb1”产量较低。
2.2 有性繁殖18个月试验结果
试验中对3份菌株分别重复5次，有性繁殖18个月后仍然统一采收，计算各个菌株的平均总产量以及各自包括的箭麻和种麻量，最后分别进行方差分析。
由表1可知，3份菌株有性繁殖18个月后采收，所得的总产量、箭麻和种麻均分别存在差异性，其中在总产量和箭麻方面，菌株“gza46”和“wmt1”与“sb1”呈显著差异，但“gza46”与“wmt1”间无差异性；3个菌株栽培后形成的种麻，菌株“gza46”与“wmt1”和“sb1”均呈显著差异， “wmt1”与“sb1”间无差异性。 3 小结与讨论
通过对不同来源的3份菌株试验，在有性繁殖6个月和18个月后采收，所得的产量均显示出菌株“gza46”的优势，在繁育种麻和生产箭麻方面可大面积推广；菌株“wmt1”在有性繁殖6个月，也表现出了一定优势，在生产上作为繁育种麻同样可以大面积应用；菌株“sb1”在有性繁殖6个月和18个月后所得的产量均较低，生产上不宜推广应用。
根据实验室分离 “gza46” 菌株的结果显示，该菌株在生物学形态特征上表现为：新生菌丝为乳白色，绒毛状菌丝仅着生于接种组织周围，后菌丝由乳白色慢慢变成黄褐色，并开始长出菌索，菌索尖端为白色，生长至老化后為红褐色，蜜环菌菌素在生长过程中形成分叉，部分节点分支菌索过多甚至类似气生菌丝。但“gza46”菌株在生长过程中的各项具体指标还需不断观察和优化，同时在应用上也要对菌株不断地提纯复壮。
参考文献
[1] 袁崇文.中國天麻[M].贵阳：贵州科技出版社，2010.
[2] 张维经，李碧峰.天麻与蜜环菌的关系[J].Journal of integrative plant biology，1980（1）：59-64，113.
[3] GUO T，WANG H C，XUE W Q，et al.Phylogenetic analyses of armillaria reveal at least 15 phylogenetic lineages in China，seven of which are associated with cultivated Gastrodia elata[J].PLoS One，2016，11（5）：154794.
[4] 王秋颖，郭顺星，樊锦艳.不同蜜环菌菌株生物学特性及菌丝体多糖含量的研究[J].中国药学杂志，2001，36（9）：588-590.
[5] 王秋颖，郭顺星，关凤斌.不同来源蜜环菌对天麻产量影响的研究[J].中草药，2001，32（9）：839-841.
[6] 黄明进，罗春丽，刘红昌，等.贵州8种树材对天麻蜜环菌生长的影响[J].贵州农业科学，2014，42（2）：115-118.
[7] 盖钧镒.试验统计方法[M].北京：中国农业出版社，2013.
关键词 蜜环菌菌株；筛选；评价
中图分类号 S567.3+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）03-0131-02
Abstract[Objective] To screen out excellent Armillaria mellea strain suitable for largescale cultivation of Gastrodia elata. [Method] Three Armillaria mellea strains（gza46， sb1， wmt1） from different sources and Gastrodia elata seeds with germination bacteria were used to conduct sexual reproduction test， the yield of G. elata was determined， the differences were compared and analyzed. [Result] The test result showed that it is better Armillaria mellea gza46 than sb1 to increase the G. elata’s yield after six months， but the difference is not significant between gza46 and wmt1. After 18 months， there is a same test result. [Conclusion] gza46 should be a fine strain of Armillaria mellea for G. elata in Dejiang County and surrounding area in Guizhou.
Key words Armillaria mellea； Screening； Evaluation
天麻（Gastrodia elata）為蘭科植物，由于本身是无根、无同化功能的叶片，不能直接吸收环境中的营养[1]，除开花结实期外，天麻幼苗的形成、营养器官的更新以及营养生长转向生殖生长等过程都必须由蜜环菌（Armillaria mellea）来供应，没有蜜环菌天麻就不能生长[2]。但蜜环菌是蜜环菌属真菌的总称，全球报道有50余种，我国已报道了7种，该属真菌具有物种多样性特征[3]。蜜环菌来源不同其生物学特性具有差异，对天麻产量的影响也较大[4-5]，且生长发育还受环境及培养菌材的限制[6]。贵州省德江县是天麻之乡，野生天麻分布广，人工天麻种植面积较大，质量好，产量高，是全国重要的天麻生产基地。因此，研究筛选出适宜德江县及周边地区天麻规模化种植所需的优良蜜环菌菌株，对提高该区域天麻生产效率、促进地方经济发展具有重要意义。笔者对德江县高山镇野生蜜环菌菌材上分离到的“gza46”号菌株及当前生产用的“sb1”“wmt1”号菌株进行了天麻有性繁殖伴栽试验，研究其对天麻产量的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
该试验所用的3份蜜环菌菌株“gza46”由贵州省现代中药材研究所提供（德江县高山镇野生蜜环菌菌材上分离），“sb1”由贵州省施秉县民生天麻科技有限公司提供，“wmt1”由贵州乌蒙腾菌业有限公司提供；有性繁殖的天麻种子均由德江县绿通天麻发展有限公司提供（德江县本地品种），种子育种箭麻经贵州省农业科学研究院朱国胜研究员鉴定为红杆天麻。试验环境、菌材、菌种量和用种量均统一，操作规程全部执行贵州省德江县天麻省级地方标准。
1.2 试验方法
试验安排在德江县绿通天麻发展有限公司天麻基地进行，统一实行林下固定菌床二层栽培模式，所用菌材25 kg/m2，以青杠和桦树为主，种子蒴果15颗，萌发菌和蜜环菌各1包，重量分别为1.0和1.8 kg，试验中每个供试菌株重复5窝，且按照天麻地方标准进行管理。分别于6个月和18个月后统计产量，对所得数据进行方差分析（ANOVA）[7]，从而得出变量间的差异显著性。
2 结果与分析
2.1 有性繁殖6个月试验结果 该试验在实施过程中分别对3份菌株重复5次，有性繁殖6个月统一采收种麻，计算蜜环菌“gza46”“wmt1”“sb1”菌株伴栽天麻的平均产量分别是3 450.2、3 289.5、1 235.2 g/m2。方差分析结果显示，蜜环菌“gza46”菌株伴栽天麻有性繁殖6个月采收所得的产量（种麻）最高，与菌株“sb1”呈显著差异，与菌株“wmt1”相当；菌株“sb1”产量较低。
2.2 有性繁殖18个月试验结果
试验中对3份菌株分别重复5次，有性繁殖18个月后仍然统一采收，计算各个菌株的平均总产量以及各自包括的箭麻和种麻量，最后分别进行方差分析。
由表1可知，3份菌株有性繁殖18个月后采收，所得的总产量、箭麻和种麻均分别存在差异性，其中在总产量和箭麻方面，菌株“gza46”和“wmt1”与“sb1”呈显著差异，但“gza46”与“wmt1”间无差异性；3个菌株栽培后形成的种麻，菌株“gza46”与“wmt1”和“sb1”均呈显著差异， “wmt1”与“sb1”间无差异性。 3 小结与讨论
通过对不同来源的3份菌株试验，在有性繁殖6个月和18个月后采收，所得的产量均显示出菌株“gza46”的优势，在繁育种麻和生产箭麻方面可大面积推广；菌株“wmt1”在有性繁殖6个月，也表现出了一定优势，在生产上作为繁育种麻同样可以大面积应用；菌株“sb1”在有性繁殖6个月和18个月后所得的产量均较低，生产上不宜推广应用。
根据实验室分离 “gza46” 菌株的结果显示，该菌株在生物学形态特征上表现为：新生菌丝为乳白色，绒毛状菌丝仅着生于接种组织周围，后菌丝由乳白色慢慢变成黄褐色，并开始长出菌索，菌索尖端为白色，生长至老化后為红褐色，蜜环菌菌素在生长过程中形成分叉，部分节点分支菌索过多甚至类似气生菌丝。但“gza46”菌株在生长过程中的各项具体指标还需不断观察和优化，同时在应用上也要对菌株不断地提纯复壮。
参考文献
[1] 袁崇文.中國天麻[M].贵阳：贵州科技出版社，2010.
[2] 张维经，李碧峰.天麻与蜜环菌的关系[J].Journal of integrative plant biology，1980（1）：59-64，113.
[3] GUO T，WANG H C，XUE W Q，et al.Phylogenetic analyses of armillaria reveal at least 15 phylogenetic lineages in China，seven of which are associated with cultivated Gastrodia elata[J].PLoS One，2016，11（5）：154794.
[4] 王秋颖，郭顺星，樊锦艳.不同蜜环菌菌株生物学特性及菌丝体多糖含量的研究[J].中国药学杂志，2001，36（9）：588-590.
[5] 王秋颖，郭顺星，关凤斌.不同来源蜜环菌对天麻产量影响的研究[J].中草药，2001，32（9）：839-841.
[6] 黄明进，罗春丽，刘红昌，等.贵州8种树材对天麻蜜环菌生长的影响[J].贵州农业科学，2014，42（2）：115-118.
[7] 盖钧镒.试验统计方法[M].北京：中国农业出版社，2013.