葡萄内生真菌及其回接对酿酒葡萄叶内生真菌和果实生理生化的影响研究

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葡萄为世界上栽培历史最久、栽培面积最广的果树之一。近年来我国葡萄产业发展迅速,不断提高葡萄品质也是现代葡萄生产和科研的首要任务。而利用葡萄本身的内生真菌来提高葡萄的适应性及其品质是一条值得尝试的新途径。本研究对同一样地的9个葡萄品种和不同产区‘赤霞珠’葡萄叶片可培养内生真菌进行分离,对分离的内生真菌采用ITS序列分析并结合形态学方法进行鉴定,探讨葡萄叶可培养内生真菌菌群的多样性和分布特征。从分离的内生真菌中选择了8株进行葡萄大田回接试验,研究了这8株内生真菌的再次接种对葡萄叶内生真菌菌群结构及葡萄果实生理生化品质的影响。获得了以下结果:  1.对采集于云南省丘北县的云南太阳魂葡萄酒庄资源圃内的9个葡萄品种不同生理状态叶片进行内生真菌的分离,结果共分离到可培养内生真菌1067株。经鉴定归属为90种28个属。其中Colletotrichum和Alternaria为优势属,优势度分别为39.08%和25.21%。这9个品种葡萄可培养内生真菌分离率为0.56~1.13,多样性指数为1.32~2.39,这9个品种葡萄的三种叶片中,健康植株成熟叶的内生真菌分离率和多样性指数基本上都高于其幼嫩叶片和发病植株的成熟叶片的。同一生境下的9个品葡萄除少数几个品种外各品种间的内生真菌具有较高的相似性。  2.对采自四个不同生境的酿酒葡萄‘赤霞珠’叶进行内生真菌的分离,结果从600块‘赤霞珠’叶片中共分离到内生真菌583株,归属于42个种22个属,其中链格孢属Alternaria和黑孢属Nigrospora为优势属。德钦和石河子两地内生真菌分离率比较高,大于1。而丘北的内生真菌多样性指数较其他生境高,为2.20。不同生理状态的叶片中嫩叶的内生真菌的分离率和多样性指数明显低于成熟叶和老叶的。这4个生境的‘赤霞珠’叶片内生真菌的相似性系数较高,在0.43-0.70之间。  3.内生真菌的再侵染改变了‘玫瑰蜜’品种葡萄叶片的内生真菌的群落结构。8种菌剂中五种菌剂的处理(Xylariasp、Nigrospora sp、Alternaria sip1、Alternaria sp2和Colletotrichum sp)在处理后的叶片中分离到了较多数量的接种菌。不同菌剂处理后葡萄叶片菌群结构差异显著。与对照相比,菌剂的处理改变了‘玫瑰蜜’叶中内生真菌的分布,增加了‘玫瑰蜜’叶中内生真菌的数量和优势度,但降低了内生真菌的多样性指数。并且发现喷施农药组内生真菌的分离率较低,但多样性相对较高。  4.在本研究中内生真菌菌剂的处理显著影响了葡萄中各生理生化指标。与对照组相比,内生真菌菌剂的处理在一定范围内通过增加POD和PAL酶活,对葡萄的抗逆性具有一定的增强作用,菌剂的处理明显提高了糖组分以及葡萄中黄酮和白藜芦醇有益健康的天然活性成分的含量,在一定范围内降低了蛋白质的含量,增强了DPPH清除率和总抗氧化性,从而增强了葡萄的抗氧化性,在一定程度上提高了葡萄及葡萄酒的品质。其中以Xylaria sp、Nigrospora sp、Chaetomiumsp和Colletotrichum sp四种菌剂的作用最为显著。表明通过外施内生真菌调控酿酒葡萄中一些成分从而调控酿酒葡萄品质是可行的,但还需要大量的深入研究工作。
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