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大花蕙兰,又称西姆比兰、虎头兰,是指兰科兰属(Cymbidium)多年生附生性草本植物。其花大色艳、花形规整丰满,姿态秀雅,花色品种较为丰富,具有很高的商品价值和极大的市场潜力。但由于兰属植物变异性丰富,中间类型很多,种的界限不清楚,给花卉品种的整理和研究带来困难,对其品质的进一步遗传改良也起着极大的限制作用。因此,对大花蕙兰的遗传多样性进行研究,有助于杂交培育新品种。本研究利用RAPD、叶绿体基因组(cpDNA)和线粒体基因组(mtDNA)的PCR-RFLP3种标记系统地评价了大花蕙兰20个品种的遗传多样性。主要研究结果如下: 1.利用RAPD标记对20份大花蕙兰的遗传多样性进行检测。结果发现50个10-碱基随机引物中有36个引物(72.0%)能揭示大花蕙兰间的多态性。36个RAPD引物在20份受试品种中共检测到214条谱带,其中199条(93%)具多态性。每个多态性引物平均可扩增出5.9个多态性片段。在20份大花蕙兰中,RAPD遗传距离变异范围为0.503-0.765,平均值为0.598。聚类分析表明,利用RAPD标记可将全部供试材料区分开,所有材料明显地聚为4类,其中Pearl Dawson‘Procyon’与其它品种差异较大,单独聚为1类。 2.利用7个叶绿体基因组(cpDNA)的PCR-RFLP标记对20份大花蕙兰叶绿体基因组(cpDNA)的遗传多样性进行分析。结果表明7个标记中6个(87.5%)可扩增出1至多条清晰的谱带,扩增产物经Hinf Ⅰ、EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ、EcoR321、BsuR Ⅰ(HaeⅢ)和EcoR881 7种限制性内切酶消化后,6个标记的19种引物/酶组合共检测到53条DNA片段。其中,多态性片段有37条,占69.8%。此标记揭示的20份大花蕙兰的遗传距离变化范围为0.571到0.949,平均值为0.766。说明大花蕙兰种质资源细胞质叶绿体基因组遗传多样性较低。聚类分析表明大花蕙兰叶绿体基因组(cpDNA)PCR-RFLP标记能将20份材料区分开来,所有材料明显地聚为3类,其中Great Flower‘Venus’与其它材料间差异较大,单独聚为1类。 3.利用8个线粒体基因组(mtDNA)的PCR-RFLP标记对20份大花蕙兰进行了遗传多样性检测。结果表明,只有3个(37.5%)线粒体基因组PCR-RFLP标记能得到1条清