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噁唑烷酮类耐药基因optrA是继多重耐药基因cfr之后第2个可介导噁唑烷酮类药物耐药的可转移耐药基因,其与cfr基因不同的耐药机制和可介导恶唑烷酮类和酰胺醇类药物耐药的特性,引起了人们的高度关注。本研究以广东某猪场为研究对象,旨在探讨optrA基因在不同来源(猪、环境和工作人员)不同菌种中的流行特点。本文研究对象为2015年采集自广东某一猪场、场内各区土壤及相关工作人员的513份样品(猪鼻拭子252份,猪肛门拭子241份,土壤12份,人8份)。经全基因组DNA检测optr A基因,最终选择86份样品采用含氟苯尼考(10μg/mL)选择性培养基分离菌株,同时PCR检测及测序比对确定optrA阳性菌株,16S r RNA扩增及序列比对鉴定菌种。结果显示,共获得17株optr A阳性菌株,包括11株肠球菌(2株粪肠球菌、3株屎肠球菌、2株坚韧肠球菌、4株鹑鸡肠球菌)和6株奇异变形杆菌。微量肉汤稀释法测定17株optrA阳性菌株对临床常用抗菌药物的敏感性,结果显示,17株菌对常用广谱抗菌药四环素和氟苯尼考均耐药。其中11株optrA阳性肠球菌对红霉素、阿莫西林、庆大霉素耐药,但对万古霉素敏感,对氨苄西林、环丙沙星、氯霉素、利奈唑胺和青霉素耐药率超过50.0%。6株奇异变形杆菌对多西环素、氨苄西林、头孢唑啉、亚胺培南、链霉素、四环素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药,对庆大霉素、头孢噻肟耐药率达到60.0%以上,对其余药物的耐药率介于30.0%~50.0%之间。采用PCR方法检测17株optrA阳性菌株中其他耐药基因。结果未检测到万古霉素耐药基因vanA、vanB、vanC,红霉素耐药基因ermC和编码ATP外排泵基因msr A/msr B。但是,检测到多重耐药基因cfr,氟苯尼考耐药基因fexA、fexB、flo R,检出率分别为35.3%、70.6%、52.9%和29.4%。红霉素耐药基因ermA和ermB的检出率分别为88.2%和82.4%,与其耐药表型基本保持一致。采用多位点序列分型(MLST)分析粪肠球菌和屎肠球菌的ST型。结果共获得4个ST型,分别为ST116,ST480,ST486和ST874。利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行亲缘关系分析,11株肠球菌共获得10个不同的谱型,6株奇异变形杆菌有5株分型成功,共获得4个不同的谱型。S1-PFGE和Southern杂交结果发现肠球菌中,optrA基因定位于质粒上的有9株,位于染色体上的有1株,同时携带cfr基因的3株肠球菌中,有2株cfr基因定位于质粒上,但与相应optr A基因不在同一质粒上。综上所述,恶唑烷酮类耐药基因optrA可以在养殖场中猪及土壤源肠球菌中流行传播。