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异养硝化菌与传统的脱氮微生物相比,具有生长速率快、脱氮效率高、对环境条件要求低等优点,而现阶段国内有关异养硝化菌的研究特别是其在人工湿地系统脱氮方面的研究还比较少。本文以下行流-上行流复合水流方式的构建湿地-复合垂直流构建湿地系统为研究对象,采用将传统方法与现代分子生物学手段相结合的新型异养硝化细菌分离筛选方法,从复合垂直流人工湿地表层基质中,成功分离出了两株异养硝化细菌,编号为H-1,H-2,通过生理生化实验,biolog菌种鉴定,16S rDNA序列分析,以及四因素三水平的正交试验,进行最佳硝化效果研究。
主要研究结果如下:
1.本文采用选择性培养基进行了异养硝化菌株的筛选,共得到了2株具有较高消化活性的细菌,编号为H-1,H-2,通过biolog实验,得到其碳源利用图谱,证明了其异养性。对其生长特性进行了研究,得到其生长曲线,最适生长碳、氮源、温度和pH。
2.对菌株H-1,H-2,进行DNA提取和16S rDNA PCR扩增,16S rDNA的序列分析结果显示,菌株H-1,H-2与产碱杆菌属(Alcaligene)粪产碱杆菌(A.faecalis)有98%相似性,所以认为从人工湿地中分离的两株异养硝化细菌都属于产碱杆菌属粪产碱菌种。
3.通过四因素三水平的正交试验,结果显示:当温度为30℃,pH为7.5,接种量为107CFU,溶氧2.25mg/L时,该菌株亚硝化反应效果最佳,影响亚硝化反应效果的因素顺序为:溶氧>温度>pH>接种量,温度和溶氧影响极显著,pH和接种量影响相对不显著。当温度为20℃,pH为4.5,接种量为107CFU,溶氧3.76mg/L,硝化反应效果最佳,影响硝化反应效果的因素顺序为:温度>pH>接种量>溶氧;pH和溶氧影响极显著,温度和接种量相对不显著。