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苹果轮纹病(Botryosphaeria dothidea)是苹果生产中的重要病害之一,目前生产上用于苹果轮纹病防治的药剂主要有苯并咪唑类、三唑类和甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。本研究检测了化学防治历史不同的三个果园中苹果轮纹病菌对四类杀菌剂6个品种的敏感频率,从中筛选出抗性菌株与敏感菌株,比较了抗性菌株与敏感菌株在生理生化方面的差异。研究结果如下: 1.通过生长速率法测定了胶州、莱阳、蒙阴3个果园苹果轮纹病菌对多菌灵、戊唑醇、苯醚甲环唑、咯菌腈和吡唑醚菌酯等5种杀菌剂的敏感频率,结果表明,三个果园的敏感频率存在差异。 多菌灵:三个果园中,EC50>0.05μg/mL的菌株所占的比例分别是莱阳果园40.0%,胶州果园45.0%,蒙阴果园87.2%。EC50值<0.03μg/mL的菌株所占的比例为莱阳39.0%,胶州37.5%,蒙阴5.1%。对多菌灵的敏感性蒙阴果园远远低于其余两个果园,莱阳果园与胶州果园敏感性差异不显著。 戊唑醇:莱阳果园EC50值为0.02~0.03μg/mL的菌株占30.3%,频率最大;胶州果园EC50值为0.05~0.1μg/mL的菌株占40.0%,频率最大;蒙阴果园EC50值为0.05~0.1μg/mL的菌株占28.2%,频率最大。对戊唑醇的敏感性莱阳果园>蒙阴果园>胶州果园。 苯醚甲环唑:三个果园中,EC50值<0.03μg/mL的菌株所占的比例是莱阳果园73.7%,蒙阴果园41.0%,胶州果园5.00%;EC50值>0.05μg/mL的菌株所占的比例是胶州果园90.0%,蒙阴果园23.1%,莱阳果园8.08%,其中胶州果园>0.1μg/mL的菌株占42.5%。对苯醚甲环唑的敏感性莱阳果园>蒙阴果园>胶州果园。 吡唑醚菌酯:EC50值<2μg/mL的菌株所占的比例为蒙阴71.8%,胶州60.5%,莱阳24.5%;EC50值>8μg/mL的菌株所占的比例为莱阳26.5%,胶州为7.9%,蒙阴5.1%。对吡唑醚菌酯的敏感性蒙阴果园>胶州果园>莱阳果园。 咯菌腈:EC50值<0.02μg/mL的菌株所占的比例为胶州95.0%,蒙阴28.2%,莱阳12.1%;EC50=0.02-0.06μg/mL的菌株莱阳占68.7%,蒙阴为59.0%,胶州为2.5%。对咯菌腈的敏感性胶州果园>蒙阴果园>莱阳果园。 2、通过对敏感菌株和抗性菌株相对适合度测定,发现: 抗多菌灵菌株在所试的低渗透压和高渗透压培养条件下,生长速率与敏感菌株无差异;相对渗率则高于敏感菌株;菌体内重要的抗逆酶 PAL酶活性低于敏感菌株,说明抗多菌灵菌株的相对适合度低。解释了苯并咪唑类杀菌剂一直保持高效的原因。 抗戊唑醇菌株在常规PDA培养基上的生长速率大于敏感菌株,而抗吡唑醚菌酯菌株在常规和高渗PDA上的生长速率均大于敏感菌株;二者的相对渗率均低于所对应的敏感菌株;抗戊唑醇菌株的PAL酶高于敏感菌株。说明抗戊唑醇菌株和抗吡唑醚菌酯的菌株相对适合度高,在田间有利于抗性的发生和发展。 3、旁路氧化酶专一性抑制剂 SHAM与吡唑醚菌酯联合作用测定结果表明,SHAM对吡唑醚菌酯具有明显的增效作用,且抗性菌株的增效作用更大。说明吡唑醚菌酯处理轮纹病菌后,菌体启动了旁路氧化途径,旁路氧化途径是菌体产生抗性的机制之一。 4、多菌灵与咯菌腈混合对苹果轮纹病菌具有明显的增效作用。