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癌症已经成为我国居民的重要死因,而目前化学治疗仍是最为常见的手段之一。大多数抗癌小分子化合物都具有高亲油性和低水溶性,导致其生物利用率低,这常被认为是这些抗癌药物开发和临床应用的一个关键障碍。目前研究发现间充质干细胞外泌体具有与干细胞相似的治疗效果,具有易于冻存、运输、定量和移植等优势,且由于其能在细胞间传递的众多生物活性分子,被认为具有良好的作为药物递送载体的潜力。然而,研究发现外泌体分离手段的差异可能显著影响外泌体的功能,且目前尚不清楚脂肪间充质干细胞(ADSCs)衍生外泌体本身对肝癌的生物学效应,也不清楚外泌体与抗癌小分子化合物是否存在协同效应。因此本文通过改进的顺序过滤法分离ADSCs外泌体并表征。采用姜黄素与虾青素作为模式药物,以载药效率为目标,从电穿孔法,共孵育法,皂素透化法,冻融循环法中选取最优载药方案,制备载药外泌体并优化,通过药物与外泌体混合组和载药外泌体组研究ADSCs外泌体同抗癌小分子化合物对在抗肝癌治疗方面的协同效应。研究发现:(1)改进的顺序过滤法分离的ADSCs外泌体,粒径主要分布在30~150nm,具有膜结构,阳性表达TSG101,CD63和CD9,GADPH,阴性表达Calnexin,且在体外经过分离程序后仍具有被细胞摄取的能力,具有生物活性。该方法获得的ADSCs外泌体抑制肝癌细胞HepG2的细胞活性和迁移能力,且增强正常肝细胞THLE-2的细胞活性。(2)在300μg/mL外泌体浓度和50μg/mL虾青素浓度下,载药效率:电穿孔法>冻融循环>共孵育法>皂苷透化法,应用电穿孔法对外泌体进行载药具有方法优势。(3)发现经过改进的超滤法分离的ADSCs衍生外泌体,在24 h内,外泌体能抑制肝癌细胞HepG2的活性(P<0.05)以及其迁移能力(P<0.05),增强肝细胞THLE-2活性(P<0.05)且对其迁移能力无显著影响。ADSCs外泌体与姜黄素的简单混合抑制了正常肝细胞的迁移能力(P<0.01)。电穿孔法制备的载姜黄素外泌体能够抑制肝癌细胞活性(P<0.01),以及其迁移能力(P<0.01),其中电穿孔载药过程,增强了外泌体与姜黄素两者混合对肝癌细胞活性和迁移能力的抑制。且减弱了对肝细胞迁移能力的促进作用。结果提示,该方法分离的ADSCs外泌体具有在肝癌治疗上的应用前景,并可用于药物递送增强其抗肝癌效应。