【摘 要】
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该研究拟建立大鼠心肌缺血和缺血再灌流模型,对实验性急性心肌缺血早期(3小时以内)、急性缺血再灌流心肌局部c-fos、egr-1mRNA及Fos、Jun和Egr-1蛋白、ET-1 mRNA及其蛋白、以及
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该研究拟建立大鼠心肌缺血和缺血再灌流模型,对实验性急性心肌缺血早期(3小时以内)、急性缺血再灌流心肌局部c-fos、egr-1mRNA及Fos、Jun和Egr-1蛋白、ET-1 mRNA及其蛋白、以及心肌细胞的凋亡和相关调控基因蛋白运用免疫组织化学、原位分子杂交和RT-PCR、原位末端标记法、电镜等技术进行检测,同时结合应用图象分析及统计学处理系统对上述研究结果进行定量分析处理。期望能够建立准确诊断较早期心肌缺血和/或缺血再灌流地灵敏、特异而又实用性指标系统。结论:1.大鼠急性心肌缺血早期(缺血60min)再灌流即可在再灌流局部心肌明显出现Fos、Jun和zif/268蛋白的阳性表达。2.研究人员成功臣应用原位杂交技术在石蜡包埋的切片上在分子水平上心肌组织原位显示了部分原癌基因的mRNA,探索出了可应用于法医学检案的灵敏指标和方法,从而有可能使法医病理学的实际检案进入到分子水平,但原癌基因的实际应用价值还有待法医检案实践的检验。3.ET-1 RT-PCR证实正常心肌组织含有少量的ET-1 mRNA,缺血60min后增加为原来的二倍,从而为ET-1蛋白免疫组化染色在分子水平提供了依据。因此内皮素也可作为反应心肌缺血性损伤的病理开头学指标之一。4.通过TUNEL和电镜检测心肌细胞的凋亡情况可作为判断心肌早期缺血性损伤的证据,从而在法医学实践中若怀疑为心性猝死者但HE常规染色下心肌无明显改变时可应用于TUNEL法作出较为准确又客观的诊断。5.免疫组化与TUNEL染色技术可应用于一般的法医学检案,但是TUNEL法或单一的免疫组化指标仍不能完全解决心性猝死的诊断,所以应两种技术结合或与勘察方法、指标的联合应用。6.图像分析与统计学处理方法能够精确、客观地定量研究免疫组化染色以及原位分子杂交结果,可以作为法医理学实验与应用研究的重要的辅助手段。
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