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研究背景及目的:
异丙酚（Propofol）是目前临床应用最广泛的静脉麻醉药，但其中枢作用机制尚未完全阐明。脑作为异丙酚的效应器官，异丙酚对不同脑区的作用存在差异，可能是作用于相应的中枢靶位而发挥其全麻效应。研究异丙酚在不同脑区的摄取和分布规律对其中枢作用机制的探索具有指导作用。
脑摄取概念由Upton等于1988年首次提出，即药物随血液灌注至脑，从血管内分布到血管外进入脑实质的过程为脑摄取。其基本的研究方法主要基于质量平衡法则（mass balance principles）：通过测量脑循环的动、静脉血药浓度差和血流量计算全脑摄取药物的量。由于实验方法的限制和脑功能的特殊性，基于质量平衡法则理论的异丙酚脑摄取研究只能通过计算间接了解异丙酚的全脑摄取情况，不能直接反映脑内各区域的实际摄取量和分布特征。为克服基于质量平衡法则异丙酚脑摄取研究的不足，Shyr和Larsson分别探索了新的脑摄取研究方法，即基于解剖脑组织的直接脑摄取研究，实验结果显示了各鼠脑区域异丙酚的浓度及其分布情况。类似的实验研究目前鲜见，认为异丙酚脑摄取和脑分布可能受到注射方式、脑摄取状态、物种差异等因素的影响，其结论也不尽一致。以往直接脑摄取实验研究多采用SD大鼠为实验动物，由于鼠脑结构和功能与人脑差别较大，难以将实验结果进行推广，因此有必要用更高等的动物对丙酚脑摄取和脑分布特征做进一步研究。犬脑为沟回脑，脑功能分区和结构与人脑相似，脑体积和质量较大，解剖标志明显，利于实验操作。
本研究前期研究了异丙酚不同麻醉深度下犬脑不同区域的摄取和分布，发现单次静脉注射不同剂量达到不同的麻醉深度时，不同脑区异丙酚的摄取量不同：浅麻醉状态时桥脑异丙酚浓度最高，深麻醉状态时丘脑最高；海马在两种麻醉状态下均最低；达到不同的麻醉深度时，颈内动脉和颈内静脉血浆异丙酚浓度差异显著，脑摄取仍在进行中。而脑循环动静脉血药浓度达到平衡状态时，异丙酚在不同区域脑组织的摄取和分布是否一致？异丙酚在相对敏感脑区的分布是否会随着全脑在摄取平衡过程中的变化而发生改变？对间脑的研究以往只涉及到背侧丘脑，而上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑四部分在以往的实验研究中未曾涉及，但与全身麻醉导致的意识丧失、物质代谢的变化、内脏活动及心血管等自主神经功能的调节相关，故有必要进行研究（注：以往研究报道的丘脑均指的是背侧丘脑）。本研究通过解剖颈内动静脉血药浓度平衡时犬脑各个不同区域组织（包括间脑的背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑五部分），采用高效液相色谱紫外法（HPLC-UV）测量异丙酚浓度，探讨脑循环动静脉血药浓度平衡时犬脑不同区域组织对异丙酚的摄取和分布规律。
材料和方法:
1. 实验动物准备与分组：
16只健康雄性成年犬，体重10-12kg，年龄12-18个月，随机分为两组：A组（T30组）和B组（T50组），每组8只。实验均安排在白天，实验前给予禁食、禁饮12小时。实验时两组均经右后肢大隐静脉建立静脉通路并保持通畅。
2. 麻醉实施：
A组：异丙酚7mg·kg-1静脉注射，注射时间为15s，续以70mg·kg-1·h-1恒速静脉输注30分钟。
B组：异丙酚7mg·kg-1静脉注射，注射时间为15s，续以70mg·kg-1·h-1恒速静脉输注50分钟。
两组实验犬达到麻醉状态——眼睑反射和踏板反射消失后，经口插入ID9号气管导管，固定并连接呼吸机，吸入纯氧，调节呼吸频率（20-25）次/分，潮气量15ml/kg，使PETCO2维持在（30-38）mmHg。同时分离右股动脉（利多卡因浸润麻醉）插入20G肝素化套管，接HP监护仪监测平均动脉压（MAP）和脉率（PR）。
3. 标本采集：
异丙酚恒速输注30min（A组）和50min（B组）时快速解剖分离犬右侧颈内动、静脉血管，各取血2ml快速注入抗凝管中，4℃冰箱中保存。同时快速断头法处死实验犬。在无菌条件下去除颅盖等组织，专人解剖获取背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑、额叶、顶叶、颞叶、海马、扣带回、小脑、中脑、桥脑、延髓、颈髓组织，踢除血管，用蒸馏水冲洗血迹，置于无菌干燥培养皿中，-17℃冰箱中保存。
4. 标本处理：
血样品抗凝后立即在4℃低温离心机中离心20min（10000r/min）分离血浆，取血浆200μl置于EP管中，加入乙腈400μl后涡旋器震荡2min，再离心10min（10000r/min），取上清液密封低温保存待检。
脑组织样品精确称量（g）后置于匀浆器中，加入乙腈（2ml/g）充分匀浆5min，匀浆液置于EP管离心5min（10000r/min）后取上清液密封低温保存待检。
5. 异丙酚色谱分析：
采用HPLC-UV-沉淀法测量异丙酚浓度，外标物为异丙酚标准品。使用岛津LC-20A色谱仪，SPD-M20A紫外检测器，色谱柱为Shim-pack VP-ODS，250×4．6mmID，Shim-pack GVP-ODS，10×4．6mmID保护柱和SIL-20A自动进样器，流动相A为纯水，流动相B为甲醇，A：B为15：85，自动进样量20μl，柱温：4℃，流速1ml/min，检测波长270nm。所用试剂为分析纯。
6. 数据分析：
采用SPSS13．0统计软件包，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。组内颈内动脉和静脉血浆异丙酚浓度比较采用配对t检验，组间异丙酚血浆浓度比较采用两独立样本t检验。不同组和不同部位脑组织异丙酚浓度比较采用重复测量的方差分析，多重比较采用LSD检验。组间相同区域脑组织异丙酚浓度比较采用两独立样本t检验。P<0．05为差异有统计学意义。
结果:
1. 麻醉状况：
所有实验动物均安全迅速达到预定麻醉状态并维持稳定，无呕吐等不良反应，PETCO2、MAP、PR均波动在正常范围内。A组30分钟与B组50分钟时脉率分别为95．00±3．25和94．63±2．33次/min，平均动脉压分别为109．86±7．16和104．50±6．00mmHg，呼气末CO2分压分别为35．00±1．31和34．50±1．60mmHg。
2. 异丙酚血浆浓度：
A组颈内动脉和颈内静脉血浆异丙酚浓度分别为4．31±0．84和4．35±0．79μg/ml，二者差异无统计学意义（t=1．003，P=0．349）。
B组颈内动脉和颈内静脉血浆异丙酚浓度分别为4．33±1．00和4．30±1．04μg/ml，二者差异无统计学意义（t=1．121，P=0．299）。
两组颈内动脉血浆异丙酚浓度比较，差异无统计学意义（t=0．044，P=0．965）。两组颈内静脉血浆异丙酚浓度比较，差异无统计学意义（t=0．092，P=0．928）。
3. 异丙酚脑组织浓度：
A组背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑、额叶、顶叶、颞叶、扣带回、海马、小脑、中脑、桥脑、延髓、颈髓异丙酚浓度（μg/g）分别为8．49±0．94、6．23±0．96、6．16±1．02、6．10±1．10、6．18±1．04、6．16±1．19、6．22±1．09、6．16±1．10、6．18±1．03、6．17±1．06、6．24±1．10、6．21±1．12、6．18±1．23、6．15±1．03、6．21±1．17，各脑组织浓度差异有统计学意义（F=79．125，P=0．000）；背侧丘脑异丙酚浓度明显高于其它脑组织（P=0．000）。
B组背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑、额叶、顶叶、颞叶、扣带回、海马、小脑、中脑、桥脑、延髓、颈髓异丙酚浓度（μg/g）分别为6．14±1．14、6．16±1．18．6．15±1．11、6．18±1．02、6．18±1．19、6．21±1．10、6．19±1．16、6．15±1．10、6．18±1．10、6．21±1．09、6．13±1．13、6．19±1．17、6．20±1．26、6．16±1．12、6．16±1．14，各脑组织浓度差异无统计学意义（F=0．206，P=0．951）。
A组背侧丘脑异丙酚浓度高于B组（t=4．489，P=0．001），两组其它相同脑区异丙酚浓度差异无统计学意义（P>0．05）。恒速给药的时间与各区域脑组织异丙酚的浓度有交互效应，恒速输注30min时背侧丘脑异丙酚浓度明显高于恒速输注50min时的浓度（F=49．334，P=0．000）。
结论:
1．异丙酚70mg·kg-1·h-1恒速静脉输注30min，犬脑循环动、静脉血药浓度达平衡状态；此时异丙酚脑摄取达动态平衡，除背侧丘脑异丙酚浓度较高外，在其它区域组织分布均衡。
2．异丙酚70mg·kg-1·h-1恒速静脉输注50min，异丙酚脑摄取处于稳定平衡状态，在犬脑各区域（背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑、底丘脑、额叶、顶叶、颞叶、海马、扣带回、小脑、中脑、桥脑、延髓、颈髓）呈均衡分布。