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目的：了解本地区大肠埃希菌（Escherichia coli，E．coli）AmpC酶基因型分布、CTX-M-14、CTX-M-15基因的携带情况，分析产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌耐药现状，为临床合理选择抗菌药物提供指导依据。 方法：1.抗菌药物敏感试验：纸片扩散法（K-B法）：采用 CLSI推荐的纸片扩散法测定西南医科大学附属医院2014年7月-2014年11月临床分离的155株大肠埃希菌对14种抗菌药物（阿莫西林克拉维酸AMC、氨苄西林AMP、头孢他啶CAZ、头孢噻肟CTX、头孢哌酮舒巴坦CFS、头孢吡肟FEP、氨曲南ATM、头孢西丁FOX、亚胺培南IMP、左氧氟沙星LEV、环丙沙星CIP、庆大霉素GEN、阿米卡星AMK、复方新诺明SXT）的耐药性，结果参照2014版CLSI标准判读，质控菌株为ATCC25922。2.ESBLs筛选和确认试验：选择CTX、CAZ以及ATM药敏纸片初步筛选试验，若 CAZ的抑菌环直径≤22 mm,ATM或CTX≤27 mm,为可疑产ESBLs菌株，进一步用双纸片法进行确认实验。3.AmpC酶初筛及三维试验：根据K-B法进行头孢西丁耐药性检测，若抑菌环≤18mm则为可疑产AmpC酶。根据三维试验方法（Coudron等推荐），由β-内酰胺酶粗提物能否水解头孢西丁（FOX）来判定其产AmpC酶与否。4.PCR技术：检测三维实验阳性菌株的AmpC酶基因及确认试验阳性ESBLs菌株的CTX-M-14，CTX-M-15酶基因型。参考文献设计8对特异性引物，采用普通质粒提取试剂盒提取待检菌株的质粒DNA作为PCR反应模板。各标本均使用分别设计好的引物扩增，扩增阳性片段长度分别为520bp(MOX)、462bp(CIT)、405bp(DHA)、346bp(ACC)、302bp(MIR)、190bp(FOX)、415bp(CTX-M-15)、205bp(CTX-M-14）。使用扩增产物进行2％琼脂糖凝胶电泳，紫外线分析装置观察结果。对部分扩增阳性的PCR产物进行测序（送至上海生工生物技术公司），将测序结果输入GenBank进行同源性分析。 结果：1.抗菌药物敏感试验结果：155株大肠埃希菌的耐药率分别为：AMP89.68%、AMC88.39%、SXT75.48%、CTX58.06%、GEN49.03%、CIP47.10%、LEV33.55%、CAZ28.39%、ATM19.35%、FEP10.97%、FOX8.39%、AMK2.58%、CFS1.29%、IMP0%。其中多耐菌株57.42%、双耐22.58%、单耐13.33%、全敏7.10%。2.产ESBLs酶菌株检测及耐药模式：本次实验菌总体产ESBLs率为62.58%，在不同耐药模式中，多耐菌株产ESBLs率（78.61%）高于单耐菌株（25%）。产ESBLs菌株中有70株为多耐,22株为双耐,15株为单耐。3.产AmpC酶菌株检测及耐药模式:产AmpC酶率9.68%，其中有12株为多耐,2株为双耐,1株为单耐。4.医院获得性感染耐药情况:医院获得性大肠埃希菌感染中产ESBLs率为67.86%，产AmpC酶率为14.29%，多耐比例达75%。5.产ESBLs与非ESBLs菌耐药率比较:产ESBLs菌株耐药率由高到低分别为：AMC98.97%、AMP97.94%、CTX87.63%、SXT87.63%、CIP65.98%、GEN56.70%、LEV47.42%、CAZ43.30%、ATM31.96%、FEP15.46%、FOX10.31%、AMK4.12%、CFS1.03%、IMP0%。与ESBLs阴性组对比，前者对AMP、AMC、CAZ、CTX、FEP、ATM、LEV、CIP、GEN、SXT耐药率高于后者。6.产 AmpC酶与非产 AmpC酶耐药率比较：产 AmpC酶大肠埃希菌耐药率分别为：AMP93.33%、AMC93.33%、LEV93.33%、SXT93.33%、CIP86.67%、CTX86.67%、CAZ73.33%、ATM66.67%、GEN60%、FEP33.33%，AMK、CFS、IMP0%。与AmpC酶阴性组对比，前者对 CAZ、CTX、FEP、ATM、LEV、CIP耐药率高于后者。7.PCR法扩增耐药基因情况：产ESBLs菌株CTX-M-14、CTX-M-15检出率均为47.42%；产AmpC酶菌株中检出pAmpC酶基因共5株，其中1株为DHA型，3株为CIT型，1株为ACT型；共同产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株共4株。8.不同耐药模式ESBLs基因情况：不同耐药模式产ESBLs菌株携带CTX-M-14、CTX-M-15的差异不具有统计学意义。9.本地不同时期耐药率比较：本次实验中大肠埃希菌对FEP、LEV、CIP、GEN的耐药率与2007年7月至2008年8月结果有所下降。10.产SSBLs菌株检测情况：本实验共检出产SSBL大肠埃希菌共4株，全为多重耐药菌，仅对AMK、IMP、CFS有较好的敏感性。 结论：1．本地区临床分离的大肠埃希菌耐药情况严重，对除碳青霉烯类外的β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类、氨基糖苷类、叶酸代谢抑制剂均呈不同程度的耐药，且多重耐药菌比例高；2．本地区大肠埃希菌产ESBLs率为62.58%，多耐模式菌株产ESBLs率高于单耐模式菌株；产ESBLs菌携带CTX-M-14、CTX-M-15比例均达46.42%，10.31%同时携带二种基因；3．本地存在产质粒型 AmpC酶大肠埃希菌，其基因型多样，3株为CIT型、1株为DHA型、1株为ACT型；4．本地存在产SSBL大肠埃希菌，产SSBL率为2.58%。