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背景癫痫是神经系统的常见病、多发病,癫痫持续状态(Status Epilepticus, SE)是神经科常见的急重症,迄今癫痫发病机制仍不十分明确。自1969年Walker提出癫痫发病的免疫假说,免疫、炎症反应在癫痫发病中的作用受到越来越多的关注。 FK506是一种免疫抑制剂,其临床应用越来越广泛。既往的研究结果证实：FK506可通过抑制神经钙调蛋白(calcineurin, CaN)的活性,抑制GABA-A受体(GABA-A receptors,GABA-A)脱磷酸化并抑制自由基产生,从而发挥抗癫痫作用。本研究建立氯化锂-匹鲁卡品大鼠SE模型,试图探究FK506是否通过调节炎症反应发挥抗癫痫作用。目的探索氯化锂-匹鲁卡品SE模型中炎性因子血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecular-1, VCAM-1)、胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecular-1, ICAM-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-a)的表达及FK506对上述炎性因子表达的影响。方法1.动物分组与SE模型制作将健康成年雄性Wistar大鼠168只随机分为SE组、 FK506组和对照组,SE组和FK506组均给予氯化锂3mol/(L-kg)腹腔注射,20h后腹腔注射新鲜配置的匹鲁卡品30mg/kg。 FK506组于匹鲁卡品注射前24h、1h分别腹腔注射FK506lmg/kg。对照组给予相同体积的生理盐水代替。2.行为学观察3.HE染色观察SE后海马神经元的损伤情况4.实时定量PCR检测VCAM-1、ICAM-1、TNF-a mRNA的表达5.免疫组织化学染色检测VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达6.采用SPSS统计软件进行统计分析,P<0.05差异有统计学意义。结果1.行为学观察SE组大鼠腹腔注射匹鲁卡品后5～10min开始出现眨眼、节律性咀嚼动作,约15min后出现节律性点头动作,40min左右出现Ⅳ级以上发作, FK506预处理明显延长癫痫发作潜伏期,降低发作程度。2.FK506减轻SE后海马神经元损伤HE染色结果显示：SE组大鼠海马神经元失去正常结构,神经元变性变形,胞质染色加深,胞核固缩,神经元数量减少,CA1、CA3区散在分布残余细胞碎片,FK506组大鼠海马神经元损伤明显减轻。3.实时定量PCR检测VCAM-1、ICAM-1、TNF-amRNA的表达SE组大鼠VCAM-1、ICAM-1、TNF-amRNA的表达量较对照组明显升高,ICAM-1、VCAM-1mRNA水平在SE1d出现高峰,SE5h TNF-a mRNA表达就达到高峰, FK506腹腔注射显著降低炎性因子的表达。4.免疫组织化学法检测VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达免疫组化结果显示：与对照组相比较,SE组VCAM-1、ICAM-1蛋白表达明显升高, FK506腹腔注射抑制SE后VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达。结论1.免疫炎性因子介导的炎症反应在SE中发挥重要作用2.FK506可通过抑制炎症反应来发挥抗癫痫作用,本研究为FK506在癫痫治疗中的应用提供新的依据。3.针对脑实质炎症或外周炎症的抗炎药物可能成为癫痫新的治疗领域