针板电晕电场对纳豆芽孢杆菌合成γ-聚谷氨酸的影响

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通过针板电晕电场作用到纳豆芽孢杆菌菌悬液,使纳豆芽孢杆菌发生突变,从中挑选出含有所需性状菌株。  实验室存放于-70℃冰箱的纳豆芽孢杆菌做为初始菌株。将活化后的纳豆芽孢杆菌培养15h,制备成菌悬液。设计几组不同电场强度和不同作用时间的实验,分别应用这几种电场作用到纳豆芽孢杆菌菌悬液,使之发生突变。将突变菌液和初始菌液接种到固体培养基,观察其生长状况和菌落形状,挑选菌落形态不同的突变菌株,通过菌株的液体发酵并测量γ-聚谷氨酸产量,从而挑选出γ-聚谷氨酸产量提高的纳豆芽孢杆菌。挑选结果:诱变后高产菌γ-聚谷氨酸产量为21.2g/L,初始菌γ-聚谷氨酸产量为2.6g/L。γ-聚谷氨酸产量变为原来的8倍。高产菌株经过三代传代培养,γ-聚谷氨酸产量不变,说明这个性状是可遗传变异。  通过菌株在固体培养基上的培养,来观察菌落生长状况和菌落形态,高产菌株的菌落较厚,表面褶皱较多,边缘不整齐呈锯齿状,有液泡,液泡约占菌落面积的4/5,菌落粘度较大,用接种针挑取时能形成拉丝,拉丝越长产量可能越大,根据这些条件挑选合适单菌落。高产菌株发酵液粘度较大,不容易离心分离,颜色较深。分离菌体前需要加入适量盐酸降低pH,随着pH的降低菌液粘度降低,容易分离菌体以及后面的提取操作。
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