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目的:研究健康人外周血贴壁单核细胞来源的树突状细胞(DC)经人喉癌细胞系Hep-2冻融抗原致敏后,在体外诱导出的高效特异抗喉癌免疫,探讨其在裸鼠移植瘤发生、发展中的作用,为临床应用DC疫苗免疫治疗喉癌提供理论与实验依据。
方法:健康人外周血贴壁单核细胞,体外联合应用人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、人白细胞介素-4(IL-4)、人肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导出DC并负载人喉癌细胞系Hep-2冻融抗原;DC激活同基因型的T淋巴细胞,用MTT法比较其所产生的Hep-2抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)与非特异性CTL在体外对人喉癌细胞系Hep-2的杀伤作用;Hep-2特异性CTL预防性接种于裸鼠皮下,观察3天后接种人喉癌细胞系Hep-2移植瘤的发生率;对已荷瘤(Hep-2)裸鼠将此种CTL分以一次和两次接种,观察其在体内对裸鼠移植瘤生长的影响。
结果:健康人外周血贴壁单核细胞在体外经GM-CSF、IL-4和TNF-α联合作用诱导出成熟DC;经人喉癌细胞系Hep-2冻融抗原负载DC活化的自体T淋巴细胞在体外对Hep-2肿瘤细胞的杀伤率明显高于未经该抗原负载DC活化的自体T细胞(Hep-2特异性CTL组91.70±4.93%,非特异性CTL组38.93±3.66%,P<0.01);Hep-2抗原特异性CTL接种到裸鼠皮下能明显预防Hep-2移植瘤的发生(预防组33%,对照组100%,P<0.005)且能抑制该移植瘤的生长。
结论:健康人外周血贴壁单核细胞来源的树突状细胞(DC)经人喉癌细胞系Hep-2冻融抗原致敏后,在体外诱导出的高效特异抗喉癌免疫反应不仅能预防裸鼠Hep-2移植瘤发生而且能抑制裸鼠移植瘤的生长。