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本论文以得到高活性的白头翁低糖基皂苷为目标,从中草药白头翁提取的皂苷中分离提纯单体皂苷,并筛选出水解单体皂苷生物活性较高的白头翁皂苷酶,考察酶解白头翁皂苷的反应条件,并进一步进行酶反应产物的分离提纯.通过测定酒精浓度和浸取温度对白头翁皂苷浸取液中皂苷、蛋白质、还原糖浸出量的影响,确定蛋白质还原糖浸出量低,皂苷浸出量高的提取白头翁皂苷的最佳条件为:酒精浓度70％、温度70℃、浸取时间6小时.500g白头翁分离得到47.2g白头翁皂苷,提取率为9.4％,硅胶柱分离提纯得到22.2g单体白头翁皂苷Ⅲ,得率为20.8％,多次层析,TLC鉴定白头翁皂苷Ⅲ为3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷]-3 β,23-羟基-△<20(29)>-羽扇豆烯-28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷.通过考察六种菌株产酶对白头翁皂苷Ⅲ的水解情况,筛选出产较高生物活性白头翁皂苷酶的菌株是sp.00.白头翁皂苷酶的最佳发酵培养时间为4天.DEAE-Cellulose离子交换层析法分离提纯白头翁皂苷酶,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定酶蛋白分子量,结果表明:第53、54管提纯酶水解白头翁皂苷能力较强,为我们所要的白头翁皂苷酶;电泳结果表明53、54管酶液在电泳图谱中均为单带,且迁移率相同,确定其分子量约为58KDa.白头翁皂苷酶最适酶反应条件为底物浓度0.2％,反应温度40℃、pH值5.0、反应时间24小时.实验中还考察了金属离子对酶活的影响:Fe<3+>10mM时对反应有激活作用,其余浓度是抑制作用;Ca<2+>10mM、50mM时对反应有激活作用,其余是抑制作用;Mg<2+>全部是抑制作用;Zn<2+>50mM、100mM对反应有激活作用,其余是抑制作用;Cu<2+>在5mM、10mM时是激活作用,其余是抑制作用.在酶反应产物的分离提纯过程中得到产物Ⅰ和产物Ⅱ,其中产物Ⅰ重量转化率为31.7％,纯品产物Ⅰ1.9g,产率为16.5％,;产物Ⅱ重量转化率为15.7％,纯品产物Ⅱ0.6g,产率为5.22％.经多次层析TLC鉴定产物Ⅰ为单糖皂苷3-O-[α-L-阿拉伯糖苷]-3β,23-羟基-△<20(29)>-羽扇豆烯-28-酸,产物Ⅱ为双糖皂苷3-O-[α-L-阿拉伯糖苷]-3β,23-羟基-△<20(29)>-羽扇豆烯-28-O-β-D-葡萄糖酯苷.