聚乙二醇修饰麦冬多糖的合成、表征、药动及生物活性研究

• 作 者: 王卓君
• 机 构: 上海中医药大学
• 出 处: 上海中医药大学
• 发表日期: 2011年期
• 关键词: 聚乙二醇 麦冬多糖 结构修饰 合成表征 组织分布 生物活性

研究证明麦冬多糖ROP是麦冬抗心肌缺血的重要物质基础，但ROP在体内半衰期短，这极大限制了其药效发挥和临床应用。因此，本研究针对ROP的不良药动行为，采用聚乙二醇(PEG)对ROP进行结构修饰，通过反应时ROP大过量制得了三种PEG接枝率均约为1.0的不同分子量的修饰物，对其药动学进行了研究，并对其中一种修饰物进行了组织分布与生物活性研究，以期望在保留ROP活性的前提下改善ROP的药动学行为。　　
具体研究内容与结果如下：　　
1.ROP的聚乙二醇修饰物MP-ROP(MP20k-ROP、MP30k-ROP、MP40k-ROP)的制备与表征　　
先活化麦冬多糖ROP的羟基，得到的活化ROP与不同分子量的甲氧基聚乙二醇胺(MP20k-NH2、MP30k-NH2、MP40k-NH2)分别按摩尔比5:1、10:1和10:1反应制备三种不同分子量的麦冬多糖ROP聚乙二醇修饰物MP-ROP(MP20k-ROP、MP30k-ROP、MP40k-ROP)。用HPGPC法对修饰物的分子量分布和接枝率进行了表征，得到三种修饰物的Mw分别为23803、34864、42721，对应的接枝率分别为1.03、0.991、0.983。　　
2.修饰物MP-ROP(MP20k-ROP、MP30k-ROP、MP40k-ROP)的药动学研究　　
对荧光预标记的修饰物FMP-ROP（FMP20k-ROP、FMP30k-ROP、FMP40k-ROP）的药时曲线和药动学参数进行了研究，并且与FROP进行了比较。修饰物FMP-ROP与FROP相比，半衰期及体内平均滞留时间显著延长，FMP20k-ROP、FMP30k-ROP、FMP40k-ROP的半衰期分别约是FROP的69、150和169倍，体内平均滞留时间分别约是FROP的34、83和128倍。修饰物FMP20k-ROP在研究的剂量范围内，给药剂量与药时曲线下面积(AUC)呈线性关系，相关系数r＞0.995，且给药方式的不同并没有带来半衰期的明显变化。　　
3.修饰物FMP20k-ROP的组织分布研究　　
对修饰物FMP20k-ROP在正常小鼠和心肌缺血模型小鼠各组织（心、肾、肝、脑、肺）的分布进行了研究和比较，同时也与FROP的分布情况进行了对比。结果除心肌组织外，心肌缺血并未造成其它组织药物分布情况的显著变化。根据FMP20k-ROP在各组织中的AUC与血浆中的AUC的比值，正常小鼠组织中含药量从高到低依次为：肾(5.47％)，肺(5.19%)，心(3.27%)，肝(2.73%)，脑(0.11%)；而缺血心肌中则为5.01%，是正常心肌的1.6倍。与FROP相比，1h时FMP20k-ROP在正常心肌和缺血心肌分布浓度分别为FROP的22.2倍和20.5倍。　　
4.修饰物MP20k-ROP的生物活性研究　　
通过体外管腔形成实验和体内血清生化指标及心肌组织病理学变化对MP20k-ROP的生物活性进行了初步研究，结果表明MP20k-ROP具有生物活性。与ROP相同，MP20k-ROP具有能明显促进人微血管内皮细胞形成管腔结构的作用，大鼠体内血清生化指标和心肌组织病理学结果表明给予MP20k-ROP后，乳酸脱氢酶(LDH)有显著改善(p＜0.01)，心肌的变性程度也得到改善。