【摘 要】
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该室前面的研究工作表明:玉米细胞质的HSP70能与CaM发生依赖钙的结合,并在HSP70分子中找到了CaM结合位点;Ca信号系统参与了热激蛋白的诱导;Ca-CaM参与了小麦幼苗耐热性的获得
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该室前面的研究工作表明:玉米细胞质的HSP70能与CaM发生依赖钙的结合,并在HSP70分子中找到了CaM结合位点;Ca<2+>信号系统参与了热激蛋白的诱导;Ca<2+>-CaM参与了小麦幼苗耐热性的获得;在热激过程中小麦CaM蛋白含量增加.该文实验从基因转录水平进一步证明Ca<2+>-CaM参与了热激基因转录的调节.用confocal测定了热激时小麦叶鞘表皮细胞内游离Ca<2+>浓度的变化,发现胞质游离Ca<2+>浓度在热激时有明显升高,且这种变化是很快的.用RT-PCR的方法从小麦Mustang幼苗中获得HSP26基因的3端不译区核苷酸片段,作为该实验探讨针.另外还以大豆HSP705端保守区及小麦CaM1-2的全基因为探针,进行了Northernblot实验.以小麦芽为材料,用CaM1-2为探针进行Northern杂交实验,在生长温度下,用CaCl<,2>和A23187共处理使CaM基因的转录水平显著升高.研究小麦CaM1-2基因与HSP26、HSP70基因在热激进程中表达的变化及变化的先后从另一方面证明Ca<2+>-CaM可能参与了热激基因转录的调节.组成型表达的CaM1-2基因在37℃热激10min后mRNA水平有明显升高,HSP26基因的表达及HSP70基因表达的提高则在热激20min后.即CaM1-2表达水平的升高先于HSP26和HSP70.进一步的限制热激时间实验表明:在37℃热激后再在22℃下给一定的恢复时间,在热激5min后HSP26就有一定表达,15min明显增加.这表明HSP26基因的转录并不需要持续的热激.短暂的热激启动胞内某一关键因素,继而引发一系列的反应,而这一系列的反应并不需要持续的热刺激.定关键因子可能是Ca<2+>,胞内Ca<2+>浓度测定的实验表明热激15min,胞内Ca<2+>浓度开始升高,5min之内胞内游离Ca<2+>浓度就有显著升高.据此提出了假设模型.
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