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目的:监测CHB患者RORγtmRNA表达情况及其相关细胞因子IL-17、IL-6在外周血清水平。探究其在CHB发生发展中的作用,为进一步阐明慢性乙型肝炎感染的发病机制与机体免疫功能紊乱状态,同时也为临床的诊断和治疗相关疾病提供依据。 方法:1选取慢性乙型肝炎重度乙型肝炎轻中度患者(CHB-LM)、慢性乙型肝炎重度(CHB-S)、慢性重型乙型肝炎(CSHB)、健康献血者(HC)作为研究对象,经知情同意后抽取外周静脉血,提取总RNA,逆转录成cDNA;实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)扩增,分析各组RORγtmRNA表达水平是否有显著差异,并分析样本RORγ t是否与HBV-DNA定量和肝功能ALT、AST是否具有相关性。2采用ELISA方法检测外周血血浆中IL-17、IL-6的浓度。分析各组之间各细胞因子浓度的差异是否有显著性。分析是否与HBV-DNA定量和RORγt mRNA表达水平具有相关性。3分别测定并分析健康对照组、慢性乙型肝炎组、肝炎肝硬化组的血清学指标,包括ALT、AST、ALB、PTA、HBV-DNA定量。 结果:1慢性乙型肝炎重度组、慢性乙型重型肝炎组外周血RORγtmRNA表达水平与正常健康组比较明显升高,P<0.05差异有统计学意义;健康对照组与慢性乙型肝炎轻中度组比较P>0.05,两组间无统计学差异;健康对照组与慢性乙型肝炎重度组比较P<0.05,差异有统计学意义;健康对照组与慢性乙型重型肝炎组比较P<0.05,差异有统计学意义;慢性乙型肝炎轻中度组与慢性乙型肝炎重度组比较P<0.05,组间有统计学差异;慢性乙型肝炎轻中度组与慢性乙型重型肝炎组比较:P<0.05,有统计学意义;慢性乙型肝炎重度组与慢性乙型重型肝炎组比较P<0.05,组间有统计学差异;2相关分析显示RORγ tmRNA的表达量与ALT测量值不存在相关性(r=0.130,P=0.277>0.05),RORγtmRNA的表达量与AST测量值呈正相关(r=0.261,P=0.027<0.05)。3进一步进行两两比较发现健康组(HC) IL-17测得量明显低于慢性乙型肝炎轻中度组(CHB-LM),差异有统计学意义(P<0.05),健康组(HC)IL-17测得量低于慢性乙型肝炎重度组(CHB-S),差异有明显统计学意义(P<0.05),健康组(HC) IL-17测得量低于慢性乙型重型肝炎(CSHB),差异有统计学意义(P<0.05);慢性乙型肝炎轻中度组(CHB-LM)IL-17测得量低于慢性乙型肝炎重度组(CHB-S),差异有统计学意义(P<0.05),慢性乙型肝炎轻中度组(CHB-LM) IL-17测得量低于慢性乙型重型肝炎(CSHB),差异有统计学意义(P<0.05);慢性乙型肝炎重度组(CHB-S)IL-17测得量与慢性乙型重型肝炎(CSHB)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对各组IL-6表达量进行完全随机化设计的秩和检验发现各组间差异无统计学意义(x2=5.568,P=0.135>0.05)。4采用Spearman秩相关对RORγtmRNA与IL-6作相关性分析发现两者之间呈正相关(r=0.292,P=-0.006<0.05)。而HBV-DNA与IL-6作相关性分析发现两者不存在线性关系(r=0.104,P=0.383>0.05)。RORγ tmRNA与IL-17作相关性分析发现两者之间呈正相关(r=0.489,P<0.05)。而HBV-DNA与IL-17作相关性分析发现两者不存在线性关系(r=0.082,P=0.494>0.05)。 结论:1本实验发现,慢性乙型肝炎重度、慢性乙型重型肝炎患者RORγtmRNA水平高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RORγ t随着疾病的发展不断增高,与疾病严重程度呈正相关。RORγ t是Th17细胞关键的转录因子,RORγ tmRNA的异常升高,提示Th17细胞表达也增高。机体的免疫平衡被打破,免疫应答增强,免疫系统开始清除入侵的乙肝病毒,在这个过程可导致大量的肝细胞的死亡,肝脏进一步破坏,肝功能下降。2慢性乙肝患者细胞因子IL-17的异常升高可能提示,在乙型肝炎疾病的发展过程中,Th17细胞通过其特异性细胞因子IL-17发挥作用。IL-6在各组无显著差异,可能是Th17细胞的免疫功能,不通过IL-6发挥作用,需要进一步深入的研究其中的关系。3 RORγtmRNA与IL-6、IL-17作相关性分析发现呈正相关。